細胞培養基本概念 細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下，使其生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞，也可以是細胞群。 細胞培養目的與用途 1、科學研究：藥物研究開發與基礎研究 藥物研究與開發 (1) 新藥篩選：如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。 (2) 疫苗研究與開發：如病毒性疫苗的研究與開發（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。 (3) 基因工程藥物研究與開發：如干擾素研究與開發，細胞生長因子研究與開發等。 (4) 細胞工程藥物研究與開發：生物活性多肽研究與開發，人參皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究與開發。 (5) 單克隆抗體制備：包括診斷用單克隆抗體，治療用單克隆抗體。 基礎研究 (1) 藥物作用機理 (2) 基因功能 (3) 疾病發生機理 2、 生物制藥 (1) 疫苗：如病毒性疫苗（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。 (2) 基因工程藥物：如在臨床醫學中具有治療價值的一些細胞生長因子如干擾素、粒細胞生長因子、胸腺肽等 (3) 診斷用和藥用單克隆抗體 (4) 細胞工程藥物：生物細胞內的一些生物活性多肽，生物活性物質等 細胞培養基本條件 1、合適的細胞培養基 合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的zui重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質，而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。 2、血清 目前，大多數合成培養基都需要添加血清。血清是細胞培養液中zui重要的成分之一，含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養成分。 3、無菌無毒細胞培養環境 無菌無毒的操作環境和培養環境是保證細胞在體外淋巴細胞培養基成功的首要條件。在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物質污染，或者自身代謝物質積累，可導致細胞中毒死亡。因此，在體外培養細胞時，必須保持細胞生存環境無菌無毒，及時清除細胞代謝產物。 4、恒定的細胞生長溫度 維持培養細胞旺盛生長，必須有恒定適宜的溫度。 5、合適的氣體環境 氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。 細胞培養基種類與基本成分 細胞培養基的種類很多，按其來源分為合成培養基和天然培養基（目前使用的培養基絕大部分是合成培養基），按其物質狀態分為干粉培養基和液體培養基兩類。干粉培養基需由實驗者自己配制并滅菌，液體培養基由專業商家提供，用戶可直接使用，非常方便。每種細胞都有其合適的培養基，詳見附表1。 1、合成培養基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質 氨基酸 氨基酸是組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異，但有幾種氨基酸細胞自身不能合成，必須依靠培養液提供，這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。因此，各種培養液中都有較大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不穩定，應置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培養液內。已含谷氨酰胺的培養液在4℃冰箱中儲存2 周以上時，還應重新加入原來量的谷氨酰胺。 碳水化合物 碳水化合物是細胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。 無機鹽 培養液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外，通過提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細胞調節細胞膜功能。培養液的滲透壓是一個非常重要的因素, 細胞通?？赡褪?60mOsm/kg −320 mOsm/kg。標準培養液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意：向培養液中加入其它物質有可能會明顯改變培養液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養液中添加HEPES 時需按以下方法調節鈉離子濃度。 |
