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食用菌種
點擊次數(shù):1632 更新時間:2016-04-11


【釋義】是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。

法律規(guī)定

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2006年3月中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《食用菌菌種管理辦法》規(guī)定:“農(nóng)業(yè)部主管全國菌種工作。縣級以上地方人民政府農(nóng)業(yè)(食用菌,下同)行政主管部門負責本行政區(qū)域內(nèi)的菌種管理工作。”“縣級以上地方人民政府農(nóng)業(yè)行政主管部門應(yīng)當加強食用菌種質(zhì)資源保護和良種選育、、更新、推廣工作,鼓勵選育、、經(jīng)營相結(jié)合。”

菌種篩選

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工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩,挑選具有某種能力的有用菌種。

菌種分離

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首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品,用無菌水稀釋后,涂布于置有適宜細菌、放線菌或霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上,并將其倒置于恒溫箱中,培養(yǎng)一定時間,平皿上長出的許多單個菌落(單一微生物的集落)經(jīng)分別分離后即為各種純種菌株,簡稱純種,移種至試管斜面培養(yǎng)基上,置4℃冰箱備用。

篩選模型

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根據(jù)不同的篩選目的,采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選抗生素產(chǎn)生菌的方法是將土壤中分離所得的純種,在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后,用打孔器將菌塊移至含有試驗菌的瓊脂培養(yǎng)基上,在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時間后取出,如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈,則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗菌生長的抗菌物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵,測定發(fā)酵液或菌絲體內(nèi)抗生素的含量,選出能力高的菌種。另一方面對所提取的抗生素進行結(jié)構(gòu)分析、藥理試驗及臨床試驗等,確為有效者,即可作為菌種。又如篩選脂肪酶菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上,恒溫培養(yǎng)一定時間,如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的,則該菌具有分解脂肪的能力,進一步作搖瓶發(fā)酵測定酶活力,挑選產(chǎn)量高者作菌種的出發(fā)菌株。

菌種改良

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即采用遺傳育種的方法,使野生型菌株(從自然界分離篩選而得的出發(fā)菌株)的遺傳因子 DNA發(fā)生突變、重組,從而從中選出產(chǎn)量高、成品質(zhì)量好或具有新的培養(yǎng)特性如耐產(chǎn)物抑制、能利用廉價原料以及具有新品種能力的優(yōu)良菌種。采用的方法有誘變育種、雜交育種、細胞融合技術(shù)和重組DNA技術(shù)。誘變育種是利用誘變因子如紫外線、鈷-60、乙烯亞胺類等物理或化學誘變劑處理菌株的單孢子懸浮液,以獲得誘發(fā)突變株。隨后進行突變株的篩選,從中篩選高產(chǎn)菌株。由于隨機的突變?nèi)后w中,有益突變所占比例很低,要獲得高產(chǎn)突變株必須進行大量篩選。近年來,隨著發(fā)酵代謝控制研究的發(fā)展,可根據(jù)生物合成途徑中的反應(yīng)點,并通過它們的改變以提高產(chǎn)率或其他特性,如選育抗產(chǎn)物反饋抑制的突變株、增加細胞透性的突變株及營養(yǎng)缺陷型的突變株等。這種“理性篩選法”廣泛應(yīng)用于氨基酸產(chǎn)生菌的選育。

菌種制備

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也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。種子制備包括孢子制備和菌絲體制備(見圖),
其中(1)~(4)為孢子制備過程。保存在沙土管或冷凍管中的菌種,無菌操作挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間)。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子,對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基。將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在上延續(xù)使用半年左右。放線菌孢子的培養(yǎng)基大多是采用麩皮或豌豆浸出液、牛肉膏及無機鹽與瓊脂制成的。將斜面孢子接入擴大的扁瓶孢子培養(yǎng)基中,于28~37℃培養(yǎng)5~14天。所獲得的大量孢子可直接作為種子罐 (6)的種子。如果有些菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶(5)液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿等),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐(7)的種子應(yīng)是生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。

菌種保存

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總述

使優(yōu)良菌種的性狀保持穩(wěn)定,人為地創(chuàng)造條件,使菌種的新陳代謝活動處于不活潑狀態(tài),即選取優(yōu)良菌種的休眠體(孢子或芽孢)或富有生命力的懸浮液在低溫或脫水狀態(tài)下保存。

低溫保存法

①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

脫水保存法

①沙土保存法,能產(chǎn)孢子的細菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經(jīng)稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長良好的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經(jīng)真空抽干,外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。  ② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管內(nèi)于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。  ③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。

食用菌菌種的概念

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一,菌種的概念 原意是指孢子(相當于植物的種子) ,但在實際中,常將經(jīng)過人工培養(yǎng)的純菌絲體連同培養(yǎng)基質(zhì)一同叫做菌種.
二,菌種的類型 在中根據(jù)菌種的來源,繁殖代數(shù)及目的,把菌種分為母種,原種和栽培種.分別叫一級種,二級種,三級種.
母種:將純菌絲體或孢子在試管培養(yǎng)基中繁殖而成.可以繁殖原種,也適宜菌種保藏.
原種:母種菌絲在固體培養(yǎng)基上繁殖而成.這一過程增強菌絲對培養(yǎng)環(huán)境的適應(yīng)性,又起到擴繁的作用.原種可以直接出菇.
栽培種:由原種擴繁而成.主要是為了擴繁,為提供足夠的菌種.

食用菌菌種的分類

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中國栽培食用菌歷史悠久。1949年以前,主要是傳統(tǒng)段木栽培方法栽培香菇和黑木耳二種。建國以后,雙孢蘑菇栽培量逐年增加。二十世紀70年代主要栽培種類增加到10個(平菇、草菇、滑菇、金針菇、銀耳、毛木耳、猴頭),80年代又增加到14個(增加了灰樹花、金耳、茯苓、天麻蜜環(huán)菌),90年代增加到44個,目前規(guī)模栽培的食用菌有雙孢蘑菇、巴西蘑菇、大肥菇、美味蘑菇、香菇、糙皮側(cè)耳、佛州側(cè)耳、肺形側(cè)耳、白黃側(cè)耳、榆黃蘑、鮑魚菇、蓋囊菇、杏鮑菇、白阿魏菇、紅平菇、元蘑、黑木耳、毛木耳、金針菇、滑菇、黃傘、草菇、猴頭、柱狀田頭菇、雞腿菇、灰樹花、長根菇、大球蓋菇、銀耳、金耳、蛹蟲草、靈芝、中華靈芝、薄蓋靈芝、松杉靈芝、茯苓、豬苓、蜜環(huán)菌(伴生天麻)、斑玉蕈、長裙竹蓀、短裙竹蓀、洛巴口蘑、牛舌菌、褐灰口蘑,其中大規(guī)模商業(yè)栽培的有31種。
從商業(yè)規(guī)模栽培的種類及其品種看,近年商業(yè)規(guī)模栽培的種類有雙孢蘑菇、巴西蘑菇、大肥菇、美味蘑菇、香菇、糙皮側(cè)耳、佛州側(cè)耳、肺形側(cè)耳、白黃側(cè)耳、榆黃蘑、杏鮑菇、白阿魏菇、黑木耳、毛木耳、金針菇、滑菇、草菇、猴頭、茶樹菇、雞腿菇、灰樹花、銀耳、靈芝、中華靈芝、薄蓋靈芝、松杉靈芝、茯苓、天麻蜜環(huán)菌、斑玉蕈、長裙竹蓀、短裙竹蓀等。這些栽培種內(nèi)都有豐富的品種多樣性,供栽培者根據(jù)市場需要選擇使用。這些多樣化的栽培種和品種保證了中國在農(nóng)業(yè)方式下食用菌的周年栽培和持續(xù)發(fā)展。 
雙孢蘑菇有鮮銷品種和罐藏品種兩大類。 香菇可以按照適宜的基質(zhì)有段木品種和代料品種;按照出菇的遲早有早生品種和遲生品種;按照產(chǎn)品適宜的商品型式有鮮銷品種和干制品種;按照出菇溫度有低溫(5~15℃)品種、中溫品種(10~15℃)、高溫(15~25℃)品種和廣溫(10~28℃)品種;按照子實體大小有大葉品種、中葉品種和小葉品種。
平菇按照出菇溫度有高溫品種、中溫品種和低溫品種;按照子實體色澤有灰色品種和白色品種;按照孢子釋放情況有少孢品種、孢子晚釋品種、無孢品種。 
黑木耳按照子實體著生方式的不同有單片品種和菊花品種;按照色澤有黑色品種和褐色品種。 
毛木耳按照子實體色澤的不同有黃背木耳、白背木耳和紫木耳三大類品種。 
金針菇按照子實體色澤有黃色品種、淡色品種和白色品種三大類。 
滑菇按照子實體發(fā)生遲早有極早生品種、早生品種、中生品種和晚生品種。 
草菇按照子實體大小有大粒、中粒和小粒三類品種。 
杏鮑菇和白阿魏菇按照出菇溫度有高溫品種和低溫品種;
杏鮑菇按照子實體形態(tài)有柱狀品種和保齡球狀品種;
白阿魏菇按照子實體形態(tài)有掌狀品種和馬蹄狀品種。

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