Ⅰ. 利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下: (1)將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵 育液 (2)37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體 (3)后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物 (4)實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑 盒檢測抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。 (5)如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的 檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對(duì)的是目的抗原。 Ⅱ.如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否造假,方法如下 : (1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。 (2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 (3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 (4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。 (5) 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的同一個(gè)指 標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。 (6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測 B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。 |