影響小鼠ELISA試劑盒結(jié)果因素 ELISA試劑盒方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定，具有靈敏度高，操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，但是在具體實(shí)驗(yàn)過程中影響因素較多，并且要按照嚴(yán)格的說明要求。 1. 內(nèi)源性物質(zhì) (1)類風(fēng)濕因子 人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合，從而導(dǎo)致假陽(yáng)性。解決該情況的辦法是：①用F(ab)2替代完整的IgG;②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性(63℃，10 min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標(biāo)本稀釋液中同樣有效);③檢測(cè)抗原時(shí)，可以用2-巰基乙醇等加入到標(biāo)本稀釋液中，使RF降解。 2. 小鼠ELISA試劑盒外源性物質(zhì) (1)標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA試劑盒測(cè)定中，會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色，干擾測(cè)定結(jié)果。為克服上述干擾作用，標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。 |
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