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影響小鼠ELISA試劑盒結果因素
點擊次數:981 更新時間:2016-11-01

影響小鼠ELISA試劑盒結果因素

ELISA試劑盒方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定,具有靈敏度高,操作簡單等優點,但是在具體實驗過程中影響因素較多,并且要按照嚴格的說明要求。

1. 內源性物質

(1)類風濕因子

人血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)可以與ELISA系統中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結合,從而導致假陽性。解決該情況的辦法是:①用F(ab)2替代完整的IgG;②標本用聯有熱變性(63℃,10 min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有效);③檢測抗原時,可以用2-巰基乙醇等加入到標本稀釋液中,使RF降解。

2. 小鼠ELISA試劑盒外源性物質

(1)標本溶血

由于各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標記的ELISA試劑盒測定中,會導致非特異性顯色,干擾測定結果。為克服上述干擾作用,標本采集時必須注意避免溶血。

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