小鼠elisa試劑盒采用酶標(biāo)抗抗體檢查多種大分子抗原 此法與雙抗體夾心ELISA的主要區(qū)別在于:小鼠elisa試劑盒它是采用酶標(biāo)抗抗體檢查多種大分子抗原,它不僅不必標(biāo)記每一種抗體,還可提高試驗(yàn)的敏感性。此法的基本程序?yàn)椋?br />① 加抗體(Ab-1)包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干 ② 加待檢抗原(Ag) → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干 ③ 加用非同種動物的特異性抗體(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干 ④ 加入酶標(biāo)抗Ab-2抗體(AB-3)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干 ⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液 ⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。 小鼠elisa試劑盒競爭ELISA 此法主要用于測定小分子抗原及半抗原,其原理類似于放射免疫測定。其基本程序?yàn)椋?br />① 抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干 ② 加入待檢抗原及一定量的酶標(biāo)抗原(對照孔僅加酶標(biāo)抗原)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干 ③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液 ④ 用ELISA檢測儀測定OD值。 被結(jié)合的酶標(biāo)抗原的量由酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來確定,如果待檢溶液中抗原越多,被結(jié)合的標(biāo)記抗原的量就越少,有色產(chǎn)物就減少,這樣根據(jù)有色產(chǎn)物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優(yōu)點(diǎn)在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測;其主要不足在于每種抗原都要進(jìn)行酶標(biāo)記,而且因?yàn)榭乖慕Y(jié)構(gòu)不同,還需應(yīng)用不同的結(jié)合方法。此外,試驗(yàn)中應(yīng)用酶標(biāo)抗原的量較多。 |