動物免疫操作技術分析 免疫原用無菌鹽水稀釋并與佐劑混合，腹腔注射抗原與佐劑*混勻后形成的穩定乳狀液，大鼠elisa試劑盒在免疫原提供持續的免疫應答基礎上進行加強免疫 周期 第1天 采血0.2ml（獲得0.1ml免疫前血清） *次免疫（抗原加弗氏*佐劑） 第14天 第二次免疫（抗原加弗氏不*佐劑） 第21天 采血和ELISA檢測 第35天 第三次免疫（抗原加弗氏不*佐劑） 第42天 采血和ELISA檢測 第56天 第四次免疫（抗原溶于PBS或鹽水） 第61天 細胞融合 大鼠elisa試劑盒操作方法 （1）小鼠腹水用冷PBS液稀釋4倍后，于1.00×105轉離心30min，去沉淀。 （2）在4℃于上清中緩緩滴加飽和硫酸銨液，邊加邊攪拌，使溶液zui終為50%硫酸銨濃度。 （3）此溶液置冰中30min~60min，然后5000r/min離心10min，去上清。 （4）將沉淀溶于Tris－HCl緩沖液（40mMol/LNaCl）中（溶液可能混濁）。 （5）裝入透析袋于Tris－HCl緩沖液（20mMol/LNaCl）中透析除鹽。 （6）離心去沉淀。 （7）溶液稀釋（1:100或更高倍稀釋）后，于280nm測蛋白含量，估計蛋白質含量1A280unit=0.8mg蛋白質一般每ml腹水中，含有總蛋白約25mg~36mg。 （8）過DEAE—纖維素柱：纖維素柱高40cm，以20mMol/LNaClTris緩沖液平衡。大鼠elisa試劑盒透析樣品以Tris緩沖液等量稀釋。 |
