人elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,人elisa試劑盒在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 操作步驟 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL; 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL; 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 人elisa試劑盒每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。 |