 |
新聞動態 |
|
 |
產品搜索 |
 |
產品目錄 |
 |
聯系我們 |
 |
上海一研生物科技有限公司
地址:上海嘉定區澄瀏公路52號
電話:021-69985169
郵編:201102
傳真:
聯系人:高麗琴
手機:13611928337
|
 |
技術文章 |
|
|
|
 |
技術文章 Article |
您現在的位置:首頁 > 技術文章 |
分析其他elisa試劑盒方法原理 |
|
點擊次數:943 更新時間:2017-06-06 |
|
其他elisa試劑盒方法原理 一、雙抗體夾心法測定抗原 1.將抗原免疫種動物獲得的抗體吸附于固相表面; 2.加抗原,形成抗原-抗體復合物; 3.加抗原免疫第二種動物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復合物; 4.加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體); 5.加底物。底物的降解量=抗原量。 二、直接法測定抗原 1.將抗原吸附在載體表面; 2.加酶標抗體,形成抗原—抗體復合物; 3.加底物。底物的降解量=抗原量。 三、間接法測定抗體 1.將抗原吸附于固相載體表面; 2.加抗體, 形成抗原-抗體復合物; 3.加酶標抗體; 4加底物。 測定底物的降解量=抗體量。 其他elisa試劑盒操作注意 1. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 2.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。 3.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。 4.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。 5.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。 6.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。 7.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。 8.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 9.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。 10.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。 11.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。 12.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 ◎ELISA試劑盒質控分析 1.人員培訓內容包括:①檢驗項目的基本原理(ELISA試劑盒原理);②熟悉檢測技巧,了解易出差錯的環節及難點;熟悉檢測試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);③熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數據處理的能力和質量控制知識;④某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經有關部門組織的專門培訓班,考試合格后持證上崗。 2.基本了解 ① 1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術應用于臨床檢驗發展為ELISA試劑盒技術。 ② 特點:ELISA試劑盒在固相表面組裝免疫活性物質形成"免疫吸附劑"。 ③ 酶標記免疫活性物質,進行信號放大; ④ 有二步溫育反應二次洗滌過程; ⑤ 靈敏度特異性相對較高。 ⑥ 局限性:只能檢測到ng水平 ⑦ 精密度差(批內CV15-20%); ⑧ 線性范圍窄(一個數量級); ⑨ |
|