目前常用的幾種大鼠elisa試劑盒方法有：測定抗體的間接法，測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。本實驗采用間接法測定單克隆抗體效價。其主要過程為：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應板的凹孔內(nèi)，加待測抗體，保溫后洗滌以除去未結合的雜蛋白質(zhì)，加酶標抗抗體，保溫后洗滌，加底物保溫30分鐘后，加酸或堿終止酶促反應，用目測或光電 比色測定抗體量。
ELISA試劑盒檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應應用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術手段。自己也為此苦惱過很長一段時間，跟著自己技術水平得進步，或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣，也是熟能生巧吧，現(xiàn)在做方陣，做ELISA已是輕車熟路了，以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的，現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色，一個工作日基本搞定。可是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的題目，本人在剛開始做ELISA時就面對良多災題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣，好比說花板，假陽性，全顯色，全部顯色。
①抗原包被：兔抗人IgG 作為抗原，用包被液l：8000稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。
②洗滌：次日傾去凹孔內(nèi)的液體，洗滌液洗3次。
③封閉：加l00μL/孔封閉液，室溫放置0.5h.
④洗滌：用洗滌液洗3次。
⑤加待測樣品(一抗)：將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清在另-塊板上用PBS 連續(xù)稀釋(按照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，大鼠elisa試劑盒每個樣品平行做兩份，PBS或空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品作為陽性對照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌：用洗滌液洗3次。
53-19-0 Mitotane 500mg 米托擔標準品
52-24-4 Thiotepa 500mg 三亞乙基硫代磷酰胺標準品
517-43-1 Sennosides 500mg 番瀉苷標準品
51-48-9 Levothyroxine 500mg 左旋甲狀腺素標準品
50-99-7 Dextrose 500mg 葡萄糖標準品
50-78-2 Aspirin 500mg 阿司匹林標準品
50-63-5 Chloroquine Phosphate 500mg 磷酸氯喹標準品
50-41-9 Clomiphene Citrate 500mg 枸櫞酸氯米芬標準品
50-28-2 Estradiol 500mg 雌二醇標準品
5002-47-1 500mg 癸氟奮乃靜標準品
4691-65-0 Disodium Inosinate 500mg 肌苷酸二鈉標準品
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