其他elisa試劑盒解決方案便是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶標志的檢測抗體,顯色底物。樣品的目標小分子的含量越高,吸光度越低。 有些客戶會用OVA(卵清卵白)做一些哮喘,ELISA試劑盒過敏性腸炎的模型,然后會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清內里IgG,IgE等指標。當客戶向我咨詢購置這幾個指標的試劑盒的時候,我很肯定地說這些指標的檢測要你自己特制,不會有商品化的試劑盒出售的。當你baidu一下時,頁面出來大量的商品化的試劑盒,千篇一律的明書時候,我真的是蒙了,我懷疑自己跟不上時代了。我不去評論這些試劑盒的真假,我仍舊建議做這些檢測指標的朋友, 方法一:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“ "、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的2.1倍,即為陽性。 方法二:用于檢測未知抗體的間接法:用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,其他elisa試劑盒加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。 含量測定 50mg 100072-200402 鹽酸克侖特羅 檢查用 100mg 100075-197902 熒光母素 含量測定 100mg 100076- 200703 左炔諾孕酮 檢查用 50mg 0082-9701 葡萄糖酸鈣 含量測定 50mg 100084-200101 酒石酸美托洛爾 含量測定 50mg 氟哌利多 含量測定 50mg 100089-200301 雙羥萘酸噻嘧啶 含量測定 50mg 100090-200301 雙羥萘酸 含量測定 100mg 100091-199601 酚酞 熔點對照品 1g 100093-200804 香草醛(熔點℃) 其他elisa試劑盒 |