ChAT,小鼠乙酰膽堿轉移酶elisa試劑盒上樣量：50ul
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠乙酰膽堿轉移酶（ChAT）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠乙酰膽堿轉移酶（ChAT）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水 操作步驟 1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL； 3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。 4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。 6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。 試劑盒性能
1. 檢測范圍：10 pmol/L – 320 pmol/L。
2. 靈敏度：檢測濃度小于1.0 pmol/L。 |
