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多聚甲醛固定微生物樣品原理闡述
點擊次數:3347 更新時間:2021-06-22

多聚甲醛固定微生物樣品原理:形成分子間的交聯,影響蛋白構型而使之固定。    優點:形態結構保存好,且穿透性強,組織收縮少。  

  缺點: 

甲醛放置過久可氧化為甲酸,使溶液pH降低,影響染色; 

醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙; 

分子間交聯形成的網格結構可能部分或*掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露。可造成假陰性的染色結果。     注意事項: 

縮短固定時間,降低固定溫度(4°C),為此組織塊不宜過厚。
改用中性緩沖福爾馬林,以pH值7.2~7.4 0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液配制成10%甲醛固定液,減少固定液pH的變化。 

固定后充分水洗以減少分子間交聯。 

切片在作免疫組化染色前,先經預處理使抗原再現(抗原修復)。 

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