小鼠Wnt-3a蛋白(WNT3A)elisa檢測試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 7. 溫育：操作同3。 8. 洗滌：操作同5。 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘。 人胚肺二倍體細胞；KMB-17 人胚腎細胞；293 [HEK-293] 人臍靜脈內皮細胞；HUV-EC 人肺細胞；HLF-a 人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38] 人胎兒胸腺細胞株；HFT-8810 [HFT8810] 人胚肺成纖維細胞；HFL1 人胚腎細胞；293 [HEK-293] 人羊膜細胞；HA 人胚肺成纖維細胞；HFL-I 人肝細胞；HL-7702[L-02] 人肝細胞；QSG-7701 [QSG7701] 人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38] 人張氏肝細胞；Chang liver 人羊膜細胞；WISH 人胚肺成纖維細胞；MRC-5 人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞；CCD-1095Sk 人正常乳腺細胞；Hs 578Bst 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92 [NK92] 人B淋巴母細胞；HMy2.CIR 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92MI [NK92MI] 人臍靜脈內皮細胞；HUV-EC-C 人正常乳腺上皮細胞；MCF 10A 人胚腎細胞；2V6.11 人正常肺上皮細胞；BEAS-2B 人肺成纖維細胞；HFL1
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