轉(zhuǎn)基因大豆EPSPS基因核酸檢測(cè)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)操作步驟:
1.液氮充分研磨樣品。
2.收集研磨成粉末的50mg樣品,置于1.5ml離心管中。
3.加入350μl65℃預(yù)熱的緩沖液IL,并加入20μl蛋白酶K劇烈地漩渦振蕩,確保所有的組織團(tuán)都分散均勻。
4.65℃水浴20-30min。水浴期間顛倒樣品數(shù)次。
5.加入350μl,充分混勻,12,000 rpm(~13,400×g)離心5分鐘。
6.小心地把上清液吸至另一新的1.5ml離心管中。注意確保不要打散沉淀團(tuán)或把組織碎片也一起轉(zhuǎn)移。
7.加入4μl RNase A,渦旋混勻。室溫放置2min。
8.加入二分之一上清體積的緩沖液IB與等體積的無水乙醇,充分混勻。如:向300μl上清中加入150μl緩沖液IB與300μl無水乙醇。
9.把上述混勻的液體轉(zhuǎn)移到吸附柱上。10,000×g離心1 min以結(jié)合DNA,棄去濾出液體。純化柱*容量為750μl,如果混合液大于750μl,請(qǐng)分兩次過柱。
10.將吸附柱重新套回收集管中,加入500μl緩沖液WB至柱子中,10,000×g離心1min,倒棄流出液;
11.將吸附柱重新套回收集管中,加入600μl DNA Wash Buffer至柱子中,10,000×g離心1min,倒棄流出液;
注意:DNA Wash Buffer使用前須按要求用無水乙醇稀釋。如果放入冰箱中,使用前須恢復(fù)到室溫。
12.再加入600μl DNA Wash Buffer至柱子中,8,000×g離心1min,棄去流出液;
13.將吸附柱重新套回2ml收集管中,轉(zhuǎn)速(>13000×g)離心空結(jié)合柱1min以干燥柱子的基質(zhì);這一步對(duì)下面的洗脫步驟至關(guān)重要。
14.將柱子置于1.5ml滅菌離心管,加入50-150μl65℃預(yù)熱的洗脫緩沖液EB至柱子的膜中央。室溫靜置5min; 15. 室溫下,離心(>13000)1min,以洗脫DNA。保留含DNA的流出液。將DNA儲(chǔ)于-20℃。
產(chǎn)品僅用于科研如非指出,所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。 血管生成素相關(guān)蛋白6抗體 Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體 酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體 脂肪酰輔酶A家族成員1抗體 芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體 磷酸化芳香胺N-乙酰化轉(zhuǎn)移酶抗體 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體 AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體 激活素受體相互作用蛋白1抗體 醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體 蛋白激酶AKT1,2,3抗體 帕金森病相關(guān)蛋白ATP13A2抗體 肌側(cè)索硬化蛋白2抗體 磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 酰基輔酶A脫氫酶長(zhǎng)鏈抗體 細(xì)胞分裂周期蛋白5抗體 β淀粉樣肽/Aβ42抗體 ADCK4蛋白抗體 抑癌蛋白AIMP3抗體 蛋白激酶A錨定蛋白6抗體 肺α/β水解酶蛋白1抗體 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體 肺α/β水解酶蛋白3抗體
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