檸檬酸合酶(CS）測試盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 7. 溫育：操作同3。 8. 洗滌：操作同5。 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘。 大鼠主動脈平滑肌細胞 HUVEC, 人臍靜脈內皮細胞 人臍動脈內皮細胞 人臍靜脈平滑肌細胞 人臍動脈平滑肌細胞 人臍帶血單個核細胞 小鼠骨髓間充質干細胞（EGFP標記） 人骨髓間充質干細胞（hMSCs） 人間充質干細胞-脂肪 人間充質干細胞-肝 人間充質干細胞-臍帶 小鼠神經干細胞 小鼠海馬神經膠質細胞（EGFP標記） 小鼠皮層神經膠質細胞（EGFP標記） 小鼠神經干細胞（EGFP標記） 人腦微血管內皮細胞 人腦血管平滑肌細胞 人海馬神經元 人少突膠質細胞 人星形膠質細胞 小鼠成纖維細胞（EGFP標記） mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 MN-c, 小鼠皮質神經元 MN-h, 小鼠海馬神經元 MSC, 小鼠雪旺細胞 MA, 小鼠星形膠質細胞 MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 CSC, 小鼠心肌細胞 mEPC, 小鼠內皮祖細胞-骨髓 MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 NSC，大鼠神經干細胞 RN-h, 大鼠海馬趾神經元 rEPC，大鼠內皮祖細胞-骨髓 RN-c, 大鼠皮質神經元 RN-s, 大鼠紋狀體神經元
|
