1-磷酸鞘氨醇檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟： 實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體，甩干，每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。
3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。
5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可終止)。
7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。 Phospho-A Raf(Ser299)磷酸化A-Raf抗體 AMPD3紅細(xì)胞腺苷脫氨酶3抗體 ABP雄激素結(jié)合蛋白抗體 ALR肝再生增強(qiáng)因子抗體 Amyloid Precursor ProteinAPP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體 AFP(A2)甲胎蛋白單克隆抗體（包被） AFP(A4)甲胎蛋白單克隆抗體(檢測(cè)) ARFIP1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體 AHR芳香烴受體抗體 ATRN吸引素抗體 ABCA1腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體 AKT2蛋白激酶B2 Angiopoietin 2血管生成素2抗體 Aromatase芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶抗體 Adenosine Receptor A2a腺苷A2A受體抗體 AKAP95蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 ASBT頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 ADAM8去整合素樣金屬蛋白酶8抗體 AADACL3芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白3抗體 ACN9ACN9蛋白抗體 ADAR1 (N-terminus)雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（N端） AMPK alpha 2腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
|
會(huì)員_a.png)