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小鼠角膜上皮細胞培養操作規程
點擊次數:646 更新時間:2022-10-20

小鼠角膜上皮細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

蘇云金芽胞桿菌加拿大亞種 Bacillus thuringiensis subsp. canadensis

蘇云金芽胞桿菌科爾默亞種 Bacillus thuringiensis subsp. colmeri

蘇云金芽胞桿菌達爾可他亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dakota

蘇云金芽胞桿菌達姆斯塔特亞種 Bacillus thuringiensis subsp. darmstadiensis

蘇云金芽胞桿菌松蜀亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

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