大鼠水通道蛋白0（AQP-0）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1.將要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的版孔進(jìn)行設(shè)定好，標(biāo)準(zhǔn)品5個(gè)點(diǎn)，每個(gè)點(diǎn)設(shè)定平行，需要用到10個(gè)孔，空白只需1個(gè)孔。剩下孔可以做為樣本孔 2.稀釋標(biāo)準(zhǔn)，準(zhǔn)備好5個(gè)EP管，然后在每個(gè)EP管中加入150微升標(biāo)準(zhǔn)稀釋液，編上編碼，分別為1，2，3，4,5，在1號管中加入150標(biāo)準(zhǔn)品，用槍頭反復(fù)吹打10次左右（注意控制幅度不要過大容易產(chǎn)生氣泡）如果有渦旋儀可以在渦旋儀上渦旋5秒左右，然后換槍頭，在1號管中取150微升加入到2號管，后面過程一次類推。后稀釋完，前面4個(gè)管中每管液體在150微升，5號管為300微升。濃度是從大到小。 3.標(biāo)準(zhǔn)、樣本、空白加樣：標(biāo)準(zhǔn)是每個(gè)濃度點(diǎn)2個(gè)孔（做平行），每孔加入50微升，加樣過程中注意換槍頭，樣本孔中每孔加入50微升，加樣過程中注意換槍頭，空白孔加入50微升蒸餾水。特別要說明的是，標(biāo)準(zhǔn)加樣和樣本加樣盡量控制在15分鐘內(nèi)加完，如果時(shí)間拖的太長，會(huì)導(dǎo)致前面孔先反應(yīng)后面孔才開始反應(yīng)，這樣數(shù)值偏差過大。加完樣后蓋上封板膜，至37攝氏度孵育30分鐘. 4.洗版，在孵育過程中可以將洗滌液配好，20ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或者去離子水定容到600ml即可。每孔加入250-300微升的洗滌液（不要漫過版孔），（如果有震蕩儀的話，可以講板子放入震蕩儀上5秒左右，然后靜止三十秒，沒有請忽略次過程）將板子在桌子上晃動(dòng)5秒左右，然后靜置30秒，甩干，拍板。說明：甩干過程盡量要快，1秒內(nèi)就可以完成，不要慢慢傾斜倒掉液體，直接翻板甩掉液體即可。拍板過程需要在桌子上墊一層吸水紙或者濾紙，版孔朝下拍幾下，拍干區(qū)別主要看吸水紙和濾紙上沒有明顯的水漬為完成。 5.每孔加入50微升的酶標(biāo)試劑，此處在空白孔中不需要加（空白孔為空），孵育30分鐘。 6.洗版同步驟4 7.顯色，先每孔中加入50微升的顯色A液，然后每孔中加入50微升顯色B液。避光37攝氏度顯色15分鐘 8.終止，每孔加入50微升的終止液，注意，加完終止液必須在15分鐘內(nèi)讀數(shù)，超過時(shí)間讀數(shù)無效。在規(guī)定時(shí)間內(nèi)讀數(shù)都是有效的。 我妻氏血瓊脂 3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂 堿性瓊脂 四號瓊脂 TCBS瓊脂 緩沖-甘油氯化鈉溶液 3%氯化鈉堿性蛋白胨水 堿性蛋白胨水 SCDLP液體培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基） 含鐵牛奶培養(yǎng)基 液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT) 卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ) 緩沖-甘油氯化鈉溶液 哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 Pfizer選擇性腸球菌瓊脂培養(yǎng)基 膽汁液態(tài)培養(yǎng)基 腦—心浸萃瓊脂培養(yǎng)基 腦—心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基 KF鏈球菌瓊脂培養(yǎng)基 疊氮化物葡萄糖液態(tài)培養(yǎng)基 MRS肉湯培養(yǎng)基
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