冷凍保存細胞之方法：
人胚肺成纖維細胞；IMR-90說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述：
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞；IMR-90說明書
形態(tài)特性成纖維細胞

生長特性貼壁生長

特征特性W.W.Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材，建立了人二倍體成纖維細胞株IMR-90。[22381]分裂潛能，病毒感受性和其它性質(zhì)都得到了充分研究，因而這株細胞可以作為WI-38或其它標準人肺細胞株的替代株。有報道稱這株細胞在表現(xiàn)出衰老前可倍增58次。[22381]

培養(yǎng)條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況P(11+5)

凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STR

同工酶

染色體

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人胚肺成纖維細胞；IMR-90說明書準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
?1.一般客戶拿到人胚肺成纖維細胞；IMR-90說明書后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
GHRH*豬促生長激素釋放激素規(guī)格48T/96T

FSH*豬促卵泡素規(guī)格48T/96T

TRH*豬促甲狀腺素釋放激素規(guī)格48T/96T

E*豬雌激素規(guī)格48T/96T

ER*豬雌二醇受體規(guī)格48T/96T

E2*豬雌二醇規(guī)格48T/96T

TGEV*豬傳染性胃腸炎病毒抗體規(guī)格48T/96T

SOD*豬超氧化物歧化酶規(guī)格48T/96T

C3*豬補體蛋白3規(guī)格48T/96T

EGF*豬表皮生長因子規(guī)格48T/96T
人胚肺成纖維細胞；IMR-90說明書α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原Alpha-AF/Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase)α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原0.5mgAlpha-AF/Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase

人α亞基人絨毛膜促性腺激素多肽抗原Alpha-HCG(HumanchorionicgonadotropinAlpha)人α亞基人絨毛膜促性腺激素多肽抗原0.5mgAlpha-HCG(HumanchorionicgonadotropinAlpha

Alpha-Synuclein核突觸蛋白（抗原）0.5mgAlpha-Synuclein核突觸蛋白（抗原

Alpha-Synuclein核突觸蛋白（抗原）0.5mgAlpha-Synuclein核突觸蛋白（抗原

AM(Adrenomedullin;ADM)腎上腺髓質(zhì)素（多肽抗原）0.1mgAM(Adrenomedullin;ADM

α－甲基酰基輔酶A消旋酶抗原AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoAracemase)α－甲基酰基輔酶A消旋酶抗原0.5mgAMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoAracemase

AMH/MISMuellerian抑制因子抗原AMH/MISMuellerian抑制因子抗原1mgAMH/MISMuellerian抑制因子抗原

腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原AMPKBeta1(AMP-activatedProteinKinasebeta-1)腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原0.5mgAMPKBeta1(AMP-activatedProteinKinasebeta-1