冷凍保存細胞之方法: 人胚腎細胞;2V6.11價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產(chǎn)品描述: 細胞名稱 人胚腎細胞;2V6.11價格 形態(tài)特性上皮細胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性這株細胞是2001年從人胚腎細胞株293衍化而來。293細胞用攜帶Zeocin-抗性標記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細胞。隨后,用包含編碼E424K的Ad5E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來。載體包含SV40病毒序列。2V6.11細胞株初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V6.11細胞誘導表達的人腺病毒E434KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測。這株細胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具 培養(yǎng)條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10% 傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 傳代情況PN5 凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO 支原體檢測陰性 STR 同工酶 染色體
![](https://img75.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/73c1482f3b90472a2ea660f4fffa7651b77e13c399f4690fbbff103d72f511f1cd2b752ca61b9752.png) 細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)人胚腎細胞;2V6.11價格準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到人胚腎細胞;2V6.11價格后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。 細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 PⅢNP*豬Ⅲ型前膠原肽規(guī)格48T/96T PⅢNT*豬Ⅲ型前膠原氨基端肽規(guī)格48T/96T ColⅢ*豬Ⅲ型膠原規(guī)格48T/96T PⅠCP*豬Ⅰ型前膠原羧基端肽規(guī)格48T/96T ZR*植物玉米素核苷規(guī)格48T/96T IAA*植物吲哚乙酸規(guī)格48T/96T VK1*植物維生素K1規(guī)格48T/96T VE*植物維生素E規(guī)格48T/96T VD3*植物維生素D3規(guī)格48T/96T VD2*植物維生素D2規(guī)格48T/96T 人胚腎細胞;2V6.11價格高遷移率族蛋白A1抗原Anti-HMGA1(highmobilitygroupAT-hook1)高遷移率族蛋白A1抗原0.5mgAnti-HMGA1(highmobilitygroupAT-hook1 Apaf-1(Apoptosisproteaseactivatingfactor-1)(NT)凋亡蛋白活性因子-1(抗原)0.5mgApaf-1(Apoptosisproteaseactivatingfactor-1 Apaf-1(Apoptosisproteaseactivatingfactor-1)(CT)凋亡蛋白活性因子-1(抗原)0.5mgApaf-1(Apoptosisproteaseactivatingfactor-1 APC活化蛋白C抗原APC(ActivatedproteinC)APC活化蛋白C抗原0.5mgAPC(ActivatedproteinC Apelin脂肪炎癥因子Apelin抗原Apelin脂肪炎癥因子Apelin抗原0.5mgApelin脂肪炎癥因子Apelin抗原 Apelinreceptor/APJreceptorApelinreceptor抗原Apelinreceptor/APJreceptorApelinreceptor抗原0.5mgApelinreceptor/APJreceptorApelinreceptor抗原 Apelin36脂肪炎癥因子Apelin36Apelin36脂肪炎癥因子Apelin361mgApelin36脂肪炎癥因子Apelin36 APG4B/AUTL1APG4B細胞自噬相關(guān)抗原APG4B/AUTL1APG4B細胞自噬相關(guān)抗原0.5mgAPG4B/AUTL1APG4B細胞自噬相關(guān)抗原 |