產(chǎn)品描述: 細(xì)胞名稱 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP培養(yǎng) 形態(tài)特性上皮樣 生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng) 特征特性 培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:2~1:3傳代。 傳代情況C3 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測(cè)培養(yǎng)法(-) STRAmelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13,14;D18S51:16,17,18,19;D19S433:17,18,OL;D21S11:28,30.2;D2S1338:18,19;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,9;D7S820:10,11;D8S1179:12,14;FGA:22,23,24;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,17,18,19,20,21; 同工酶 染色體
![](https://img75.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/73c1482f3b90472a2ea660f4fffa765147722102fde23446e966ec651d8e2df050780244b64eeae6.png) 冷凍保存細(xì)胞之方法: 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 Pepsin*小鼠胃蛋白酶規(guī)格48T/96T 小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit,48T/96T*小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit,48T/96T規(guī)格48T/96T VK1*小鼠維生素K1規(guī)格48T/96T VE*小鼠維生素E規(guī)格48T/96T VD3*小鼠維生素D3規(guī)格48T/96T VD2*小鼠維生素D2規(guī)格48T/96T VD*小鼠維生素D規(guī)格48T/96T VC*小鼠維生素C規(guī)格48T/96T VB6*小鼠維生素B6規(guī)格48T/96T VB12*小鼠維生素B12規(guī)格48T/96T 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP培養(yǎng)CC趨化因子受體3抗原CCR-3(CCchemokinereceptor3)CC趨化因子受體3抗原0.5mgCCR-3(CCchemokinereceptor3 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原CCR-4(C-Cchemokinereceptor4)細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原0.5mgCCR-4(C-Cchemokinereceptor4 CCR-6/CD196peptide細(xì)胞表面趨化因子受體6抗原CCR-6/CD196peptide細(xì)胞表面趨化因子受體6抗原0.5mgCCR-6/CD196peptide細(xì)胞表面趨化因子受體6抗原 CCR-7(CCchemokinereceptor7)CC趨化因子受體7(多肽)0.5mgCCR-7(CCchemokinereceptor7 CD10抗原CD10/CALLA(NeutralEndopeptidase)CD10抗原0.5mgCD10/CALLA(NeutralEndopeptidase CD105/EndoglinCD105蛋白CD105/EndoglinCD105蛋白0.2mgCD105/EndoglinCD105蛋白 CD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原CD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原0.5mgCD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原 CD117/c-kit/SCFR干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原(抗原)0.5mgCD117/c-kit/SCFR干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原(抗原 注意事項(xiàng): ?1.一般客戶拿到293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP培養(yǎng)后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。 收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 |