冷凍保存細胞之方法: 人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產品描述: 細胞名稱 人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1說明書 形態特性球 生長特性懸浮生長 特征特性該細胞由OettgenF及其同事從一名29歲的患有廣泛、快速進展性惡性黑色素瘤的白人男性患者的胸導管中分離建立的。該細胞可產生黑色素,電鏡檢測發現細胞中色素顆粒與自身合成和吞噬作用相關。在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者體內發現了針對該細胞系的抗體。 培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS 傳代方法維持細胞濃度在1×105~2×105,每周補液2~3次。 傳代情況C5 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:13,16;D19S433:15,16.2;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,23;D3S1358:14,16;D5S818:12,13;D7S820:12;D8S1179:16;FGA:18,20;TH01:6;TPOX:11;vWA:16,17; 同工酶 染色體53~73,XY
細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1說明書準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1說明書后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 SP1/PSβ1-G*人特異性β1糖蛋白規格48T/96T HG*人皰疹抗體規格48T/96T HSF-1*人熱休克因子1規格48T/96T HSPgp96*人熱休克蛋白糖蛋白96規格48T/96T HSP-90*人熱休克蛋白90規格48T/96T HSP-70*人熱休克蛋白70規格48T/96T Hsp-60*人熱休克蛋白60規格48T/96T HSP-40*人熱休克蛋白40規格48T/96T HSP-27*人熱休克蛋白27規格48T/96T HSP-20*人熱休克蛋白20規格48T/96T 人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1說明書重組人白介素-1受體拮抗劑rh-IL-1Ra(RecombinantHumanInterleukin-1receptorantagonistHisTag)重組人白介素-1受體拮抗劑100ugrh-IL-1Ra(RecombinantHumanInterleukin-1receptorantagonistHisTag RhoC抗原RhoC(RashomologgenefamilymemberC)RhoC抗原0.5mgRhoC(RashomologgenefamilymemberC RhoA抗原RhoA(RhoAprotein)RhoA抗原0.5mgRhoA(RhoAprotein rh-TNFalphaproteinGSTTagged重組人腫瘤壞死因子rh-TNFalphaproteinGSTTagged重組人腫瘤壞死因子100ugrh-TNFalphaproteinGSTTagged重組人腫瘤壞死因子 重組人腫瘤壞死因子rh-TNF-Alpha(rh-TumorNecrosisFactoralpha)重組人腫瘤壞死因子100ugrh-TNF-Alpha(rh-TumorNecrosisFactoralpha 重組人血管內皮細胞生長因子rh-VEGF(GSTTag)(RecombinantVascuoarendothelialgrowthfactor)重組人血管內皮細胞生長因子0.1mgrh-VEGF(GSTTag Raf激酶抑制蛋白抗原RKIP(Rafkinaseinhibitorprotein)Raf激酶抑制蛋白抗原0.5mgRKIP(Rafkinaseinhibitorprotein 環指蛋白148抗原RNF148(Ringfingerprotein148)環指蛋白148抗原0.5mgRNF148(Ringfingerprotein148 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1說明書貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 |