細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）人胃癌細胞；MKN-45圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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產品描述：
細胞名稱 人胃癌細胞；MKN-45圖片
形態特性圓

生長特性貼壁生長

特征特性該細胞系由SAkiyama建立，源于一位35歲患有印戒細胞癌的女性的胃淋巴結。

培養條件RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

傳代方法建議初始濃度2.0×105cells/ml，1:3傳代；4~5天１次。

傳代情況C3

凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養法（-）

STRAmelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：8，11；D16S539：10；D18S51：16；D19S433：14，16.2；D21S11：31；D2S1338：OL；D3S1358：15，16；D5S818：10，11；D7S820：10，11；D8S1179：13，17；FGA：19，24；TH01：7；TPOX：8；vWA：19；

同工酶

染色體67~71

注意事項：
?1.一般客戶拿到人胃癌細胞；MKN-45圖片后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；
（3）非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；
（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；
（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；
（7）視具體情況而定。
sLR*人可溶性瘦素受體規格48T/96T

sPL-A2*人可溶性磷脂酶A2規格48T/96T

sRANKL*人可溶性核因子κB受體活化因子配基規格48T/96T

sFASL*人可溶性凋亡相關因子配體規格48T/96T

sFAS/Apo-1*人可溶性凋亡相關因子規格48T/96T

sp185/HER-2*人可溶性蛋白185規格48T/96T

B7-2/sCD86*人可溶性白細胞分化抗原86規格48T/96T

sCD40L*人可溶性白細胞分化抗原40配體規格48T/96T

sCD30L*人可溶性白細胞分化抗原30配體規格48T/96T

sCD28*人可溶性白細胞分化抗原28規格48T/96T
人胃癌細胞；MKN-45圖片Tsg101抗原Tsg101(Tumorsusceptibilitygene101protein)Tsg101抗原0.5mgTsg101(Tumorsusceptibilitygene101protein

惡性腫瘤特異性生長因子抗原TSGF(TumorSpecificGrowthFanctor)惡性腫瘤特異性生長因子抗原0.5mgTSGF(TumorSpecificGrowthFanctor

TSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)(NT)促甲狀腺素受體（抗原）0.5mgTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor

TSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)(CT)促甲狀腺素受體（抗原）0.5mgTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor

促甲狀腺素受體抗原TSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)促甲狀腺素受體抗原0.5mgTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor

TSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor)促甲狀腺素受體（抗原）0.5mgTSHR(Thyroidstimulatinghormonereceptor

肺癌腫瘤阻抑基因1抗原TSLC1(tumorsuppressorinlungcancer-1)肺癌腫瘤阻抑基因1抗原0.5mgTSLC1(tumorsuppressorinlungcancer-1

TSLP(Thymicstromallymphopoietinisoform1)淋巴細胞生成素-1（抗原）0.5mgTSLP(Thymicstromallymphopoietinisoform1
冷凍保存細胞之方法：
人胃癌細胞；MKN-45圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。