細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）人肝癌細胞；HHCC圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
我司常期代理ATCC

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產品描述：
細胞名稱 人肝癌細胞；HHCC圖片
形態特性上皮細胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性

培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況

凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養法（-）

STRAmelogenin:X；CSF1PO:9,10；D13S317:?；D16S539:9,10；D18S51:16,17；D21S11:27,28；D3S1358:15,18；D5S818:11,12；D7S820:8,12；D8S1179:12,13；FGA:18,21；PentaD:8,15；PentaE:7,14；TH01:7；TPOX:8,12；vWA:16,18

同工酶

染色體

注意事項：
?1.一般客戶拿到人肝癌細胞；HHCC圖片后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；
（3）非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；
（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；
（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；
（7）視具體情況而定。
*G-CSF(RabbitGranulocyteColonyStimulatingFactor)ELISAKit兔粒細胞集落刺激因子規格：96T

*Alpha2-AP(RabbitAlpha2-Antiplasmin)ELISAKit兔子α2抗纖溶酶規格：96T

*SAA(RabbitSerumamyloidA)ELISAKit兔血清淀粉樣蛋白A規格：96T

*Hpt/HP(RabbitHaptoglobin)ELISAKit兔結合珠蛋白/觸珠蛋白規格：96T

*Plg(RabbitPlasminogen)ELISAKit兔子纖溶酶原規格：96T

*BMPs(Rabbitbonemorphogeneticproteins)ELISAKit兔骨形成蛋白規格：96T

*OPG(RabbitOsteoprotegerin)ELISAKit兔骨保護素規格：96T

*Amylin(RabbitAmylin)ELISAKit兔胰淀素規格：96T

*cTn-I(RabbitcardiactroponinI)ELISAKit兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ規格：96T

*RANKL(RabbitreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand)ELISAKit兔核因子κB受體活化因子配基規格：96T
人肝癌細胞；HHCC圖片*Anti-MCP-1/CCL2單核細胞趨化蛋白1抗體(人)規格：0.2ml

*Anti-MCP-2/CCL8單核細胞趨化蛋白2抗體（人）規格：0.2ml

*Anti-MCP-2/CCL8單核細胞趨化蛋白2抗體(大、小鼠)規格：0.2ml

*Anti-MCP-3/CCL7單核細胞趨化蛋白3抗體規格：0.2ml

*Anti-MCP-3/CCL7單核細胞趨化蛋白3抗體規格：0.2ml

*Anti-CCL9/CCL10巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體規格：0.2ml

*Anti-MastCellTryptase肥大細胞蛋白酶7抗體規格：0.2ml

*Anti-TPSB2肥大細胞類胰蛋白酶β2規格：0.1ml

*Anti-MC-1R黑皮質素-1受體抗體規格：0.2ml

*Anti-MCSFReceptor巨噬細胞集落刺激因子受體抗體規格：0.1ml
冷凍保存細胞之方法：
人肝癌細胞；HHCC圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。