冷凍保存細胞之方法: 人子宮頸表皮癌細胞;ME-180培養冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產品描述: 細胞名稱 人子宮頸表皮癌細胞;ME-180培養 形態特性上皮細胞 生長特性貼壁生長 特征特性這株細胞來源于一個細胞集落不規則沒有顯著角質化的侵染性鱗狀細胞癌。單層培養的細胞間可以觀察到帶狀連接,也注意到有細胞質張力絲。1970年發現支原體污染并去除。腫瘤壞死因子(TNF)α抑制ME-180的生長。這株細胞含有人瘤病毒(HPV)DNA,與HPV-39的同源性高于HPV-18。 培養條件McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)優質胎牛血清,10% 傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。 傳代情況P(126+5) 凍存條件*培養基+8%DMSO 支原體檢測陰性 STRAmelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11,13;D16S539:12,13;D18S51:12;D19S433:13,15.2;D21S11:30,31;D2S1338:18;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:14;FGA:23;TH01:8,9.3;TPOX:8,10;vWA:15,17 同工酶 染色體
細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人子宮頸表皮癌細胞;ME-180培養準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到人子宮頸表皮癌細胞;ME-180培養后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 *Anti-CaMK2a/FITC熒光素標記鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CaMK2b/FITC熒光素標記鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2b抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CANX/FITC熒光素標記抗鈣連蛋白抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ISR-Alpha/RBITC紅色熒光素羅丹明標記(RBITC)胰島素受體-α抗體IgG(標記抗體)規格:0.2ml *Anti-CAP2/FITC熒光素標記環化酶相關蛋白CAP-2抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Cap43/NDRG1/FITC熒光素標記分化相關基因Cap43抗體IgG規格:0.2ml *Anti-CAS/FITC熒光素標記細胞凋亡敏感性基因抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Casein/FITC熒光素標記抗牛酪蛋白抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Caspase-1/FITC熒光素標記天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Caspase-3/RBITC紅色熒光素羅丹明標記(RBITC)Caspase-3蛋白抗體(標記抗體)規格:0.2ml 人子宮頸表皮癌細胞;ME-180培養*Anti-PLCG1/PLCgamma1磷酯酶Cγ1抗體規格:0.2ml *Anti-Phospho-PLCgamma1(Tyr771)磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規格:0.1ml *Anti-Phospho-PLCgamma1(Ser1248)磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規格:0.1ml *Anti-Phospho-PLCgamma1(Tyr783)磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規格:0.1ml *Anti-PKCgamma/SCA14蛋白激酶C亞型G抗體規格:0.2ml *Anti-Phospho-PKCgamma(Thr514)磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體規格:0.1ml *Anti-Phospho-PKCgamma(Thr674)磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體規格:0.1ml *Anti-PKCdelta蛋白激酶C亞性D型抗體規格:0.2ml *Anti-phospho-PKCdelta(Tyr52)磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體規格:0.1ml *Anti-phospho-PKCdelta(Thr505)磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體規格:0.1ml 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人子宮頸表皮癌細胞;ME-180培養貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 |