細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人肝癌細胞株;Huh-7/F24價格準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人肝癌細胞株;Huh-7/F24價格貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產品描述: 細胞名稱 人肝癌細胞株;Huh-7/F24價格 形態特性上皮樣 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS 傳代方法1:3傳代,3-4天傳1次 傳代情況C5 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STR 同工酶 染色體
 注意事項: ?1.一般客戶拿到人肝癌細胞株;Huh-7/F24價格后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 *Anti-EGFR/FITC熒光素標記表皮生長因子受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-EGFRvIII/FITC熒光素標記表皮生長因子受體III型突變體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-EGFR/PE熒光素PE標記表皮生長因子受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-EGFR/Gold金標記表皮生長因子受體抗體IgG規格:0.5ml *Anti-Phospho-EGFR(Ser1046/1047)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長因子受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Phospho-EGFR(Thr669)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長因子受體抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Egr-1/FITC熒光素標記早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-eIF2alpha/FITC熒光素標記真核啟動因子2α抗體IgG規格:0.2ml *Anti-eIF4E/FITC熒光素標記真核翻譯起始因子4E抗體IgG規格:0.2ml *Anti-phospho-eIF4E(pSer209)/FITC熒光素標記磷酸化eIF-4E(Ser209)抗體IgG規格:0.2ml 人肝癌細胞株;Huh-7/F24價格*Anti-VCAM-1/CD106血管內皮細胞粘附分子抗體規格:0.1ml *Anti-VCAM-1血管內皮細胞粘附分子抗體規格:0.1ml *Anti-LAMP-1/CD107a溶酶體相關膜蛋白1抗體規格:0.2ml *Anti-VCP含纈酪肽蛋白抗體規格:0.1ml *Anti-VDAC等電壓依賴性陰離子通道抗體規格:0.2ml *Anti-VDCC-LalphaL-型電壓依賴型鈣通道α抗體規格:0.1ml *Anti-VDCC-LBetaL-型電壓依賴型鈣通道β抗體規格:0.1ml *Anti-VEGF血管內皮生長因子抗體規格:0.1ml *Anti-VEGF血管內皮生長因子抗體規格:0.1ml *Anti-VEGF-A血管內皮生長因子A抗體規格:0.2ml 冷凍保存細胞之方法: 人肝癌細胞株;Huh-7/F24價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |