產(chǎn)品名稱 | 人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物說明書 | 英文名稱 | Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives | 貨號(hào) | EYX99038 |
人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物【Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives】 人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物是從人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取的,人胚胎絨毛膜細(xì)胞從正常人胚胎絨毛膜組織制備。正常人胚胎絨毛膜組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 ![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b308a4746a373f0adddc1d0f84d8b517907581032a6d36784940.png)
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b30890d5e434ca4166f0ee6a67be83e87fef79a8257d62f82f4f.png) 操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 羊源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測(cè)/盒Doxapram hydrochloride monohydrate813鹽酸多沙普侖 牛源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測(cè)/盒Dorzolomide hydrochloride16932鹽酸多佐胺 豬源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測(cè)/盒Donepezil hydrochloride101鹽酸多奈哌齊 藥敏紙片Domperidone5786多潘立酮 致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定試劑盒5支/盒Docosanoic acid1125二十二烷酸 O-Benzyl-L-tyrosine 中文名:O-芐基-L-酪氨酸 分子式:C16H17NO3 度:98.0% 小鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 Benzyl L-(+)-mandelate 中文名:L-(+)-扁桃酸芐酯 分子式:C15H14O3 度:98.0% 小鼠激酶(PK)ELISA試劑盒 N-Benzoyl-leucine 中文名:N-苯甲酰基-亮氨酸 分子式:3 度:98.0% 小鼠轉(zhuǎn)酶elisa試劑盒 小鼠轉(zhuǎn)酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠轉(zhuǎn)酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠轉(zhuǎn)酶試劑盒、小鼠轉(zhuǎn)酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N6-Benzoyladenine 中文名:N6-苯甲酰基腺嘌呤 分子式:C12H9N5O 度:98.0% 小鼠基轉(zhuǎn)移酶elisa試劑盒 小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒、小鼠基轉(zhuǎn)移酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Betamipron 中文名:倍他米隆 分子式:C10H11NO3 度:98.0% 小鼠表皮生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 小鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒、小鼠表皮生長(zhǎng)因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 櫻草素 HPLC≥98% 20mg MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISA試劑盒巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鷹嘴豆芽素A HPLC≥98% 20mg MonkeyN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硬飛燕草堿 HPLC≥98% 20mg Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA試劑盒猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硬脂酸甲酯 GC≥98% 50mg Mouse15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISA試劑盒小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 油酸 鑒別 0.1ml Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISA試劑盒小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 油酸甲酯 GC≥98% 100mg Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit小鼠17羥皮質(zhì)類(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 柚皮苷 HPLC≥98% 20mg Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA試劑盒小鼠17羥皮質(zhì)類(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 柚皮苷二氫查爾酮 HPLC≥98% 20mg Mouse17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit小鼠17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 柚皮素 HPLC≥98% 20mg Mouse17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISA試劑盒小鼠17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 柚皮素O葡萄糖醛酸苷 HPLC≥98% 10mg Mouse25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人胚胎絨毛膜細(xì)胞提取物說明書Tebipenem pivoxil 中文名:泰比培南酯 分子式:C22H31N3O6S2 醇脫氫酶(ADH)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Tazobactam acid 中文名:他唑巴坦酸 分子式:C10H12N4O5S 脂氧合酶(LOX)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣 Taxilluside A 中文名: 分子式:C18H24O10 酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)試劑盒 可見分光光度法 10管/9樣 Tauroursodeoxycholic acid 中文名:牛磺熊去氧膽酸 分子式:C26H45NO6S 脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FASN Taurocholic acid 中文名:牛磺膽酸 分子式:C26H45NO7S 脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FASN 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 |