PrimaCell™大鼠心肌成纖維細胞試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

犬球蛋白G(IgG)試劑盒 Dog Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit  15291-75-5銀杏內酯A規格  Ginkgolide A

英文名稱HumanOxLDLELISAKit人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)規格：96T/48T  15291-77-7銀杏內酯B  Ginkgolide B

化微粒體1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測試劑盒20  15291-76-6銀杏內酯C說明書  Ginkgolide C

RatImmunoglobulinM,IgMELISA試劑盒大鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規格：96T/48T  107438-79-9銀杏內酯J品牌  Ginkgolide J

小鼠粘蛋白4(MUC4)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC4 ELISA Kit  481-46-9銀杏素規格  Ginkgetin
26339-90-2七葉皂苷B品牌  Escin IB   英文名稱RatTG-AbELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(TG-Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T

26116-89-2鬧羊花II說明書  Rhodojaponin-II  英文名稱RatTG-AbELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(TG-Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T

26116-89-2鬧羊花II品牌  Rhodojaponin-II  英文名稱RatTestoteroneELISAKit大鼠睪同(Testoterone)ELISAKit規格：96T/48T

26116-89-2鬧羊花II  Rhodojaponin-II   英文名稱RatTestoteroneELISAKit大鼠睪同(Testoterone)ELISAKit規格：96T/48T

26091-79-2白當歸腦品牌  Byakangelicol   英文名稱RatTATELISAKit大鼠凝血酶-抗凝血酶復合物(TAT)規格：96T/48T
小鼠著絲粒蛋白H(CENPH)ELISA試劑盒 ，英文名： CENPH ELISA Kit  異連翹苷規格  Isoforsythiaside

血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA檢測試劑盒MonkeyVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3ELISAkit 96T/48T  6817-41-0異蓮心堿  Isoliensinine

犬繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)試劑盒 Canine Mullerian Inhibiting Substance/Ai-Mullerian Hormone,MIS/AMH ELISA Kit  2450-53-5異綠原酸A說明書  Isochlorogenic acid A

英文名稱HumanniicoxidesyhaseELISAKIT人合成酶(NOS)ELISA試劑盒規格：96T/48T  14534-61-3異綠原酸B品牌  Isochlorogenic acid B

化微粒體1脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量檢測試劑盒20  32451-88-0異綠原酸C規格  Isochlorogenic acid C
PrimaCell™大鼠心肌成纖維細胞試劑盒價格59-30-3葉酸說明書  Folic acid   豬早老素2(PS-2)試劑盒 Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit

59219-65-7豯薟苷品牌  Darutoside  豬早老素1(PS-1)試劑盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit

590-46-5鹽酸甜菜堿說明書  Betaine   豬載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒 Pig apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit

58812-37-6川楝素規格  Toosendanin   豬載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 Porcine apo-B100 ELISA Kit

58749-23-8甘草查爾酮B規格  Licochalcone B   豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。