PrimaCell™人小梁網(wǎng)細胞試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

英文名稱MouseAILR1ELISAKIT小鼠AILR1規(guī)格：96T/48T  35286-58-9地榆皂苷I品牌  Ziyuglycoside I

腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)瓦辛斯泰雷(WahinStarry)銀染試劑盒50  35286-59-0地榆皂苷Ⅱ規(guī)格  Ziyuglycoside II 

RatGelsolinELISA試劑盒大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  482-89-3靛藍  Indigo

小鼠自身調(diào)節(jié)因子(AIRE)ELISA試劑盒 ，英文名： AIRE ELISA Kit  479-41-4靛玉紅說明書  Indirubin 

犬C肽(C-Peptide)ELISA檢測試劑盒 96T/48T  551-08-6丁烯基苯酞品牌  n-Butylidenephthalide
6989-21-5蒼術(shù)酮  Atractylon   組蛋白脫乙酰化酶1(HDAC1)活性比色法定量檢測試劑盒20

69884-00-0擬人參皂苷F11  Pseudoginsenoside F11  組蛋白脫乙酰化酶(HDAC)總活性比色法定量檢測試劑盒20

69659-80-9丹參酮IIA-磺酸鈉品牌  Tanshinone IIA-sulfonic    組蛋白染色質(zhì)沉淀(CHIP)分析試劑盒10/20

69659-80-9丹參酮IIA-磺酸鈉規(guī)格  Sulfotanshinone  Injection   組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1(LYSINESPECIFICDEMETHYLASE-1;LSD-1)活性熒光定量檢測試劑盒

69363-14-0五味子酚規(guī)格  Schisanhenol   組蛋白H4乙酰化檢測試劑盒10/20等
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  32449-98-2Khasianine品牌  Khasianine

小鼠載脂蛋白C1(APOC1)ELISA試劑盒 ，英文名： APOC1 ELISA Kit  20316-62-5銀椴苷規(guī)格  Tiliroside

單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA檢測試劑盒Monkeymonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit 96T/48T  51938-32-0夏佛塔苷  Schaftoside

犬堿性1酸酶(ALP)試劑盒 Canine alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit  260413-62-5女貞苷說明書  Ligustroflavone

英文名稱HumanAngiopoietin-2ELISAKit人血管生成素-2(ANG-2)規(guī)格：96T/48T  113443-70-2大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌  Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside
PrimaCell™人小梁網(wǎng)細胞試劑盒價格194851-84-8酸棗仁皂苷D品牌  Jujuboside D  英文名稱RatMyoglobinELISAKit大鼠肌紅蛋白(MYO)規(guī)格：96T/48T

19408-84-5二氫辣椒堿規(guī)格  Dihydrocapsaicin   英文名稱RatMotilinELISAKit大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

19309-14-9小豆蔻明  Cardamonin   英文名稱RatMotilinELISAKit大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

19275-46-83-異倒捻子素  3-isomangostin   英文名稱RatMMP-9ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)規(guī)格：96T/48T

19210-12-9哈巴俄苷品牌  Harpagoside   英文名稱RatMMP-5ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)規(guī)格：96T/48T