人臍靜脈組織提取物【Umbilical: Normal Human Umbilical Vein Derivatives】

通常臍靜脈主要由腸系膜上靜脈與脾靜脈匯合而成，但由于腸系膜下靜脈及胃左靜脈匯入部位的不同，故肝門靜脈的組成又有各種類型。公司科技提供來自新鮮或冷凍人臍靜脈組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

苯扎氯銨 ELISA試劑盒96TMeclizine hydrochloride142鹽酸美克洛嗪

喹乙醇代謝物 ELISA試劑盒96TMebendazole314319甲苯咪唑

嘔吐毒素(DON)免疫親和柱 ELISA試劑盒96TMarsdenoside F85831

替米考星 ELISA試劑盒96TMannitol695甘露醇

玉米赤霉烯酮（F2）ELISA試劑盒96TMannioside A389225
Ethyl rutinoside  中文名：蕓香糖乙苷  分子式：C14H26O10  度：98.0%  兔子催乳素elisa試劑盒   兔子催乳素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子催乳素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

18-Hydroxytritriacontan-16-one  中文名：  分子式：C33H66O2  度：98.0%  兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒  

Mannitol  中文名：甘露醇  分子式：C6H14O6  度：98.5%  兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒  

Phomaligol A  中文名：  分子式：C14H20O6  度：%  兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒  

ucralose  中文名：三氯蔗糖  分子式：C12H19Cl3O8  度：99.0%  兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒
十二水合硫酸鐵銨(>98%,BR)  Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品阿斯巴塘(aspaame)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

鉬酸銨四水  Ammonium molybdate, tetrahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品阿斯巴塘(aspaame)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20

磷鉬酸銨(>96.5%,BR)  Ammonium phosphomolybdate , hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>96.5%,BR 化妝品氨含量光譜法定量檢測試劑盒20

氫銨鈉(>98%,BR)  Ammonium  phosphate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品氨熒光定量檢測試劑盒20

丁二酸銨(>98%,BR)  Ammonium succinate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20

硫代硫酸銨  Ammonium thiosulfate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 化妝品甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

鹽酸氨丙啉(>99%,BP)  Amprolium hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BP 化妝品環(huán)氨酸(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20

三氧化二銻(>98%,BR)  Antimony (III) oxide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品環(huán)氨酸(cyclamate)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

甲亞胺鹽(>95%，BR)  Azomethine-H mono salt  質(zhì)量規(guī)格：>95%，BR 化妝品三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

天青C(>50%,BS)  Azure C  質(zhì)量規(guī)格：>50%,BS 化妝品糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20
人臍靜脈組織提取物價(jià)格兔阿霉素(ADR)ELISAKit                 5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  中文名：  分子式：C22H25N3O2 

兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit                 5-Aminoindole  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

兔S100b   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     4-Aminosalicylic acid  中文名：4-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3 

兔S100A6蛋白   英文名稱：   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   S100A6  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  4551-69-3  中文名：4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式：C17H14N2O2  度：98.0%   

兔P-選擇素(rabbit P-selectin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名：  分子式：C7H9N3O3

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。