細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）小鼠雜交瘤細(xì)胞；Human IgG培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
我司常期代理ATCC

Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，小鼠雜交瘤細(xì)胞；Human IgG培養(yǎng)貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多小鼠源細(xì)胞。

產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；Human IgG培養(yǎng)
形態(tài)特性淋巴母細(xì)胞樣

生長特性半貼壁生長

特征特性該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交，細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗，可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。

培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測

STR

同工酶同工酶鑒定

染色體

注意事項(xiàng)：
?1.一般客戶拿到小鼠雜交瘤細(xì)胞；Human IgG培養(yǎng)后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Texas/05/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人支氣管成纖維細(xì)胞HBF

J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞

CM-H107人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系

人癌細(xì)胞;MCF7 人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠雜交瘤細(xì)胞；Human IgG培養(yǎng)*GITR(glucocorticoidinducedtumornecrosisfactorreceptor)糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗原規(guī)格：0.5mg

*GLI1(GLI-Kruppelfamilymember1)下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗原規(guī)格：0.5mg

*GLP-1/KG-31(Glucagon-likepeptide-1)peptide胰高血糖素樣肽-1（多肽）規(guī)格：0.5mg

*GLP-1peptide胰高血糖素樣肽-1（多肽）規(guī)格：0.1mg

*GLP-1Rpeptide胰高血糖素樣肽-1受體多肽規(guī)格：0.5mg

*GLUT3(Glucosetransporter3)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗原規(guī)格：0.5mg

*GM-CSF(Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactors)粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗原規(guī)格：0.5mg

*GPA33(glycoproteinA33transmembrane)糖蛋白A33(跨膜)抗原規(guī)格：0.5mg

*glypican1磷脂酰基醇蛋白聚糖-1抗原規(guī)格：0.5mg

*GPC3(glypican3;IntestinalproteinOCI-5;GTR2-2;MXR7)磷脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽)規(guī)格：0.5mg
冷凍保存細(xì)胞之方法：
小鼠雜交瘤細(xì)胞；Human IgG培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。