小腦顆粒細胞和腫瘤原代細胞提取物【Human Cerebellum MatchPair: Normal Cerebellar Granule Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives】

人小腦顆粒細胞和腫瘤原代細胞提取物是從人原代小腦顆粒細胞和腫瘤細胞中提取的，人原代小腦顆粒細胞和腫瘤細胞分別從正常人小腦組織和腫瘤組織中制備。正常人小腦組織和腫瘤組織采集自各地方醫院，采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

布魯氏桿菌抗體檢測試紙條卡/包，包/盒Fenbendazole4327芬苯達唑

小反芻獸疫病毒抗體檢測試紙條卡/包，包/盒Fenazox616187氨芬酸鈉

小反芻獸疫抗體ELISA檢測試劑盒96TFelodipine7296非洛地平

?？谔阋呖贵wELISA檢測試劑盒96TFebuxostat143非布索坦

牛羊布病抗體ELISA檢測試劑盒96TFalcarinol2185
Febuxostat  144060-53-7  中文名：非布索坦  分子式：C16H16N2O3S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin2(Eotaxin2/CCL24)ELISA試劑盒  

Falcarinol  21852-80-2  中文名：  分子式：C17H24O  度：%  關鍵詞：    小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒           

Falcarindiol  55297-87-5  中文名：  分子式：C17H24O2  度：97.0%  關鍵詞：  抗真菌; 抗生素; 鎮痛; DNA拓撲異構酶抑制劑; 當歸; 聚乙炔; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠嗜環蛋白/親環素A(CyPA)ELISAKit  

Ezetimibe  BBP80298  中文名：依澤替米貝  分子式：C24H21F2NO3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISAKit  

Exemestane  107868-30-4  中文名：依西美坦  分子式：C20H24O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠細胞因子ELISAKit
石英砂(AR,6-10目或2-3mm)  Sand  質量規格：AR,6-10目或2-3mm 犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)試劑盒 Dog Pancreatic iacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit

石英砂(AR,8-16目或1-2mm)  Sand  質量規格：AR,8-16目或1-2mm 犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Canineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T

二氫銨(SP)  Ammonium phosphate monobasic  質量規格：SP 犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)試劑盒 Canine acetylcholine receptor aibody,AChRab ELISA Kit

二甲基亞砜(光譜級，>99.9% (GC))  Dimethyl sulfoxide  質量規格：光譜級，>99.9% (GC) 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒CaninehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISAKit 96T/48T

N,N-二甲基乙酰胺(光譜級,≥99.8%(GC))  N-N-Dimethylacetamide  質量規格：光譜級,≥99.8%(GC) 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)試劑盒 Canine hepatitis B virus surface aigen,HBsAg ELISA Kit

二甲基亞砜(ACS,光譜級)  Dimethyl sulfoxide  質量規格：ACS,光譜級 犬抑制素β-B(Inhbb)試劑盒 Canine inhibin beta-B,Inhbb ELISA Kit

乙二醇(光譜 ,≥99%)  Ethylene glycol  質量規格：光譜 ,≥99% 犬游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 Canine Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit

甘油(for spectroscopy,≥99.5%)  Glycerol in water for HPLC verification  質量規格：for spectroscopy,≥99.5% 犬游離*狀腺原氨酸(Free-T3)試劑盒 Canine Free i-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit

碳酸鋰(SP)  Lithium carbonate  質量規格：SP 犬游離脂肪酸(FFA)試劑盒 Dog free fatty acids,FFA ELISA kit

新亞銅試劑鹽酸鹽一水合物(99%)  Neocuproine hydrochloride monohydrate  質量規格：0.99 犬誘導型合成酶(iNOS)試劑盒 Dog inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit
小腦顆粒細胞和腫瘤原代細胞提取物培養土壤纖維素酶（S-CL）測試盒   可見分光光度法   50管/24樣  4-Amino-3-hydroxybenzoic acid  2374-03-0  中文名：4-氨基-3-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%   

土壤無機0（S-PHOS）含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣  4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid  116-63-2  中文名：4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S  度：98.0%   

土壤無機0（S-PHOS）含量測試盒   可見分光光度法   50管/24樣  4-Aminoantipyrine  中文名：4-氨基安替比林  分子式：C11H13N3O  度：99.0%

土壤脫氫酶(SDHA)測試盒   可見分光光度法   50管/24樣              4-Aminoantipyrine  中文名：4-氨基安替比林  分子式：C11H13N3O 

土壤酸性蛋白酶試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣  4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S  度：99.0%

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。