小鼠冠狀動脈組織提取物【Coronary Artery:Normal MouseCoronary Artery Derivatives】 動脈是由心室發(fā)出的血管。冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠冠狀動脈組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 小鼠冠狀動脈組織提取物價格 | 英文名稱 | Coronary Artery:Normal MouseCoronary Artery Derivatives | 貨號 | EYX99408 |
實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存; 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作要點; 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。 DNA非變性PAGE電泳試劑盒0次 3H,2-Benzodithiol-one,1-dioxide66413H,2-苯并二硫醇-酮,1-二氧化物 DNA尿素PAGE電泳試劑盒次 3-Ethyl-methyl-pyrrolin-one7666 Hygromycin B solution 潮霉素溶液 ml3-Ethoxyandrosta,5-dien7β-ol2661483-乙氧基雄,5-二烯7β醇 磷酸酶抑制劑混合物(0×)1ml/5×1ml 3-Ethoxyandrosta,5-dien7-one97263-乙氧基-雄甾,5-二烯7-酮 0.1M 磷酸鹽緩沖液0ml3-Ethoxy-ethoxycarbonyl phenylacetic acid994699 Dabigatran etexilate 中文名: 分子式:C34H41N7O5 豬生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 D(-)-Arginine 中文名:D-精氨酸 分子式:C6H14N4O2 豬內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 Cyromazine 中文名:環(huán)丙氨嗪 分子式:C6H10N6 豬內(nèi)皮細(xì)胞生長因子A(VEGF-A)ELISA試劑盒 Cyproterone acetate 中文名:醋酸環(huán)丙氯地孕酮 分子式:C24H29ClO4 豬生成素2elisa試劑盒 豬生成素2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T , Cyproheptadine hydrochloride 中文名:鹽酸賽庚啶 分子式:C21H22ClN 豬生成素1elisa試劑盒 豬生成素1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T x 牛血清白蛋白V Purity≥96% 100mg ELISAKitTXB2人血栓素B2規(guī)格:48T/96T 女貞苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitVA人維生素A規(guī)格:48T/96T 諾卡酮 GC≥98% 20mg ELISAKitVB12人維生素B12規(guī)格:48T/96T 諾米林 HPLC≥98% 20mg ELISAKitVB6人維生素B6規(guī)格:48T/96T 歐當(dāng)歸內(nèi)酯A HPLC≥98% 20mg ELISAKitVCAM-1/CD106人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1規(guī)格:48T/96T 歐夾竹桃苷 HPLC≥98% 5mg ELISAKitVC人維生素C規(guī)格:48T/96T 歐前胡素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitVD2人維生素D2規(guī)格:48T/96T 帕夏查耳酮 HPLC≥98% 10mg ELISAKitVD3人維生素D3規(guī)格:48T/96T 派立辛 HPLC≥98% 20mg ELISAKitVDR人維生素D受體規(guī)格:48T/96T 派利文堿 HPLC≥98% 20mg ELISAKitVDR人維生素D受體規(guī)格:48T/96T 小鼠冠狀動脈組織提取物價格脫氧酚elisa試劑盒 脫氧酚試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 脫氧酚試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:脫氧酚試劑盒、脫氧酚eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Abiraterone acetate 中文名:乙酸阿比特龍酯 分子式:C26H33NO2 度:98.0% 脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit Abiraterone acetate 154229-18-2 中文名:乙酸阿比特龍酯 分子式:C26H33NO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-Amino-4-hydroxyanthraquinone 116-85-8 中文名:1-氨基-4-羥基蒽醌 分子式:C14H9NO3 度:98.0% 脫氫表雄酯elisa試劑盒 脫氫表雄酯試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 脫氫表雄酯試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:脫氫表雄酯試劑盒、脫氫表雄酯eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Araliadiol 中文名: 分子式:C15H20O2 脫氫表雄酯(DHEA-S)ELISA試劑盒 9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 54232-58-5 中文名: 分子式:C18H30O3 度:95.0% 關(guān)鍵詞: |