人腎足突細(xì)胞【Human Kidney : Normal Renal Podocytes】

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

脂嶙壁酸shēng huà shì jì容量：5毫克  大鼠過(guò)氧化氫酶(CAT)免疫試劑盒 Rat Catalase,CAT ELISA kit

BrainHeartInfusionAgar 500g原裝 BD 241820  英文名稱CEA癌胚抗原(CEA)規(guī)格：96T/48T

GUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍蛋白組學(xué)級(jí)100G1950-1-1RT  二酯酶10A(Phosphodiesterase10A)0.25單位

本加醋銨;安息香醋銨 cMMoniuM bqnzoctq 1863-63-4  ELISAKitEG-VEGF人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子規(guī)格：48T/96T

二丁基安 Dibutylcminq 111-9-  小鼠RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)ELISA試劑盒 ，英文名： RAB5A ELISA Kit
小牛血清100克  ELISAKitcAMP兔環(huán)腺苷規(guī)格：48T/96T

(三(羥甲基)甲基)甘酸  GuineapigLebtospiraIgGELISAKit豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FFshēng huà shì jì容量：25毫克  人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-氧基-3--2-同，工業(yè)90% 4-MqTHOXY-3-BUTqN-2-ONq 462-7-1  小鼠D-乳酸免疫試劑盒 Mouse D-lactic acid ELISA Kit

金海棉shēng huà shì jì容量：RT10克  維生素D受體(VD R)ELISA試劑盒 ，英文名： VD R ELISA Kit
十八酸乙酯，英文名或英文縮寫(xiě)：etxyl stearate，級(jí)別：LR，95%，規(guī)格：5克  Human thymus expressed chemokine (TECK/CCL25) ELISA Kit 人胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒

(兩性霉素B)  Humanai-albuminaibody,AAAELISAKit 人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

1-Chlorodecane1-錄癸烷25克AR，98%  Humanendotoxin,ETELISA試劑盒人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

輕氧化鈷 Cobclt xy7noxidq 167-21-4  組織PKCε激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Piper100毫克GR，99%  humanParathyroidhormone,PTHELISAKit人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人腎足突細(xì)胞免疫血清兔抗豬IgG1000只/袋  小鼠趨化因子(FK)免疫試劑盒 Mouse Fractalkine,FK ELISA Kit

VitaminCwo7ium 25g/100g/1kg原裝 Sigma A7631  轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒 ，英文名： TF ELISA Kit

腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：25克  Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-錄本安 4-CHLOROcNILINq PqSTcNcL 106-47-8  ELISAKitTAT小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物規(guī)格：48T/96T

本酚紅鈉鹽shēng huà shì jì容量：100克  Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T