小鼠腎小管組織提取物【Tubular: Normal Mouse Tubular Derivatives】

腎小管是與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管，具有重吸收和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)，分布位置和功能分成三部分：近端小管，細(xì)段和遠(yuǎn)端小管。腎小管在腎髓質(zhì)中。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍小鼠腎小管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

EDANS acidgN,N-dimethyl-Quinoxalinamine355526

EDANS  saltg2-Hydroxyquinoxaline11967

Cy3 phosphoramidite0mgSulfaquinoxaline5磺胺喹噁啉

Cy5 phosphoramidite0mgMetamizole 689安乃近

Cy5.5 phosphoramidite0mgValsartan1378623纈沙坦
D-arabinitol  中文名：  分子式：C5H12O5    豬緊張素Ⅱelisa試劑盒   豬緊張素Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬緊張素Ⅱ試劑盒，

Dantron  中文名：1,8-二羥基蒽醌  分子式：C14H8O4    豬假血友病因子elisa試劑盒   豬假血友病因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T  

Danshenxinkun A  中文名：丹參新醌甲  分子式：C18H16O4    豬心肌肌鈣蛋白Ⅰelisa試劑盒   豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒，

Damnacanthal  中文名：虎刺醛  分子式：C16H10O5    豬纖溶酶原激活物抑制因子elisa試劑盒   豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T  

Dabigatran etexilate benzenesulfonate  中文名：苯磺酸達(dá)比加群酯  分子式：C40H47N7O8S    豬生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
泮托拉唑鈉1.5水合物  Pantoprazole Sesquihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 Rat thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit

泮托拉唑鈉1.5水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)  Pantoprazole Sesquihydrate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板活化因子(PAF)試劑盒 Rat platelet activating factor,PAF ELISA KIT

(S)-10-羥基喜樹(shù)堿;10-羥基喜樹(shù)堿  (s)-10-hydroxycamptothecin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA檢測(cè)試劑盒RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T

10-羥基喜樹(shù)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  (s)-10-hydroxycamptothecin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,S構(gòu)型，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒 Rat platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit

甘草素（消旋）  Liquiritigenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein Ib,GPIb ELISA Kit

芹糖甘草苷；甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷  Liquiritin apioside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein IIb,GPIIb ELISA Kit

芹糖異甘草苷；異甘草苷芹糖  Isoliquiritin apioside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 Rat Thrombopoietin,TPO ELISA kit

白屈菜紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品）  Chelerythrine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGF-A)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor A,PDGF-A ELISA kit

TAE684  NVP-TAE684  質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的ALK抑制劑 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit

青蒿酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Artemisic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit
小鼠腎小管組織提取物神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3elisa試劑盒   神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3試劑盒、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  9-Dehydroandrostenedione  1035-69-4  中文名：9-去氫雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%   

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒     9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  中文名：9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴  分子式：C29H26O4  度：98.0%

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISAKit     9-Hydroxy-4-androstene-3,17-dione  560-62-3  中文名：9-羥基-4-雄甾烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3 

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  17α-Estradiol  57-91-0  中文名：17α-雌二醇  分子式：C18H24O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒              9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  中文名：9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴  分子式：C29H26O4

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。