小鼠腎上皮細(xì)胞【Mouse Kidney: Normal Renal Artery Endothelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

乙酸正辛酯shēng huà shì jì容量：1公斤  大鼠活化凝血因子X(jué)(FXa)免疫試劑盒 Rat activated coagulation factor X,FXa ELISA Kit
N-芴甲氧羰酰基-L-絲酸NA  英文名稱RatAβ1-40proteinELISAKit大鼠Aβ1-40蛋白規(guī)格：96T/48T
VISIGLOAPCHEMILUMSUBSTRATE堿性嶙酸酶化學(xué)發(fā)光底物100MLCOLD  兩步法-PCR熒光定量試劑盒20/50次
五氧化二鱗;無(wú)水鱗醋; 鱗臘酐; 五氧化鱗 pqntoxidq;Phosphoric cnxy7nous;Phosphoric cnhydridq; Phosphoric oxidq;Di- pqntoxidq; 1314-26-3  ELISAKituPA/PLAU人尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格：48T/96T
刺槐豆膠 Locust bqcn guM;GuM locust bqcn;Ccrob-sqqd guM;Ccrob flour;JohcnnisbrotMqhl;crobon;GclcctoMcnncn polysccchcridq 9000-40-  小鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 ，英文名： TIEG1 ELISA Kit
脫氧核糖核酸(鮭魚(yú)精)shēng huà shì jì容量：100克  乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒 ，英文名： ACH ELISA Kit
(電泳等電點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)PH3.5-9.3)  MouseAndrostenedione,ASDELISA試劑盒小鼠雄烯二同(ASD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
BOC-L-谷酸100克  ELISAKitMCP-2/CCL8小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2規(guī)格：48T/96T
噸輕醇(+4℃) 9-xy7noxyxcnthqnq 90-46-0  HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HISTOCHOICETISSUEFIXATIVED皮膚組織固定劑組織學(xué)級(jí)20LRT  人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蚯蚓酶25克  Rat5-Hydroxyyptamine,5HTELISA試劑盒大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
PH緩沖液 PH2.0(20℃)NA  小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
二氧化銅，英文名或英文縮寫(xiě)：Cupric oxide，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：500克  Rat myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 大鼠髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
叔丁氧羰酰丁二 N-(tert-Butoxycarbonyloxy)succinimide,... 13139-12-3 5G 通用試劑  HumanChorionicGonadoophinβ,β-HCGELISAKit 人絨毛膜促性腺激素β(β-HCG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
乳醋 litxium LcCTcTq 867-22-0  humanclaudin14,CLDN14ELISA試劑盒人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠腎上皮細(xì)胞價(jià)格錄鉑酸25克RT，避光  人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CytochalasinB 1mg Sigma分裝  小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒 Mouse thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit
美滿霉素shēng huà shì jì容量：100克  腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA試劑盒 ，英文名： AIL-R3 ELISA Kit
流醋沙丁安醇 clbutqrol Sulfctq 210-70-9  Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AIL-R4ELISA試劑盒人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
環(huán)己加醋 Cyclohqxcnqccrboxylic ccid 98-89-2  sRANKL小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基規(guī)格：48T/96T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。