小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞提取物【Mouse Thyroid: Normal Thyroid Derivatives】

小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代甲狀腺上皮細(xì)胞提取的，小鼠原代甲狀腺上皮細(xì)胞從正常小鼠甲狀腺組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

螺旋霉素殘留檢測(cè)試紙條Bis(2-carboxyethyl)isocyanurate2雙(2-羧乙基)異脲酸酯

黃曲霉毒素B1殘留檢測(cè)試紙條Bis(2,6-diisopropylphenyl)carbodiimide21624雙(2,6-二異基)碳二亞胺

β-內(nèi)酰胺類藥物和四環(huán)素類藥物殘留檢測(cè)試紙條Biphenyl-carboxylic acid7166-甲酸

β-內(nèi)酰胺類藥物、頭孢類藥物和四環(huán)素類藥物殘留檢測(cè)試紙條Bindone175雙茚二酮

四環(huán)素類藥物、氟喹諾酮類藥物和磺胺類藥物殘留檢測(cè)試紙條Bi-linderone12273759
L-(+)-Arginine  中文名：L-(+)-精氨酸  分子式：C6H14N4O2  度：98.0%  小鼠白介素-17   英文名稱：    ierleukin-17   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   IL-17

D-Aspartic acid  中文名：D-天冬氨酸  分子式：C4H7NO4  度：98.0%  小鼠白介素-18   英文名稱：    ierleukin-18   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   IL-18

L-Ascorbic acid  中文名：L-抗壞血酸  分子式：C6H8O6  度：98.0%  小鼠白介素-23   英文名稱：    ierleukin-23   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   IL-23

Anthraquinone  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2  度：98.0%  小鼠白介素-27   英文名稱：   ierleukin-27   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   IL-27

p-Anisil  中文名：茴香偶酰  分子式：C16H14O4  度：98.0%  小鼠白介素16(IL-16)ELISAKit
雄烯二酮  4-Androstene-3,17-dione  質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR 人髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T

雄烯二酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  4-Androstene-3,17-dione  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99% 人髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG人髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG人髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG規(guī)格：48T/96T

赤芝酸A   Lucidenic acid A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97% 人他克莫司(FK506)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaacrolimus-FK506ELISAKit 96T/48T

維生素E琥珀酸酯;D-α-生育酚琥珀酸酯  Vitamin E succinate  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 96T/48T

伊沙匹隆  Ixabepilone (Azaepothilone B; BMS 247550)  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶(PPI)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 96T/48T

5-甲基胞嘧啶   5-methylcytosine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人肽聚糖(PG)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 96T/48T

7-乙基喜樹(shù)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  7-Ethylcamptothecin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人糖0脂酰肌醇(GPI)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanglycophosphatidylinositol,GPIELISAKit 96T/48T

7-乙基喜樹(shù)堿  7-Ethylcamptothecin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人糖化白蛋白(GA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanGlycatedAlbumin,GAELISAKit 96T/48T

(-)-Blebbistatin  (-)-Blebbistatin  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人糖化蛋白(GSP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 96T/48T

奈達(dá)鉑;順糖氨鉑  Nedaplatin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanGlycatedhemoglobinA1c,GHbA1cELISAKit 96T/48T
小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞提取物價(jià)格基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子 -2(TIMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D     Rosuvastain Calcium  147098-20-2  中文名：瑞舒伐他汀鈣  分子式：C22H28FN3O6S 

基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子 -1(TIMP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D  Rosuvastain Calcium  147098-20-2  中文名：瑞舒伐他汀鈣  分子式：C22H28FN3O6S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1（TIMP-1）   96T/48T                 Ornidazole  16773-42-5  中文名：奧硝唑  分子式：C7H10ClN3O3 

基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）   96T/48T  Ornidazole  16773-42-5  中文名：奧硝唑  分子式：C7H10ClN3O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T                 Trazodone hydrochloride  25332-39-2  中文名：鹽酸曲唑酮  分子式：C19H23Cl2N5O

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。