細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)犬腎細胞;MDCK(NBL-2)圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,犬腎細胞;MDCK(NBL-2)圖片貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多其它源細胞。 產品描述: 細胞名稱 犬腎細胞;MDCK(NBL-2)圖片 形態特性上皮樣;多角 生長特性貼壁生長 特征特性1958年,MadinSH和DarbyNB從表觀正常的成年雌性科克獵犬的腎建立了MDCK細胞株。角蛋白陽性。該細胞曾被用于研究β淀粉前體蛋白的 成及其蛋白水解產物的分類。 培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:2~1:6傳代;2~3天換液1次。 傳代情況C5 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STR- 同工酶 染色體76~80
 注意事項: ?1.一般客戶拿到犬腎細胞;MDCK(NBL-2)圖片后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 MN-h, 小鼠海馬神經元 LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠小梁網細胞*培養基 100mL CRFK貓腎細胞 CRFK feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 白細胞介素-1超家族 NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 Pt K1 (NBL-3)(長鼻袋鼠腎細胞) 犬腎細胞;MDCK(NBL-2)圖片CL-0346HBE(人支氣管上皮樣細胞)5×106cells/瓶×2 DMT1 Others Human 人 DNMT2 / DMT1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 人肺泡上皮細胞總RNAHPAEpiC NA K562細胞,慢性髓原白血病 人胚肺二倍體細胞,HLF-02細胞 lovo, 人結腸癌細胞 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 冷凍保存細胞之方法: 犬腎細胞;MDCK(NBL-2)圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |