冷凍保存細胞之方法: 兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產品描述: 細胞名稱 兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF圖片 形態特性成纖維樣 生長特性貼壁生長 特征特性北京眼科研究所建系細胞。 培養條件F12:Ham'sF12NutrientMixture5%FBS 傳代方法1:3~1:6傳代;2~3天1次。 傳代情況P5 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STR- 同工酶 染色體
 細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF圖片后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 Sars結構蛋白表達株;293 001A KIR2DL3 Others Human 人 KIR2DL3 / CD158B2 / NKAT-2 人細胞裂解液 (陽性對照) NCI-H157 人非小細胞肺腺癌細胞 Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞 THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽) 人張氏肝細胞;Chang liver 人上皮細胞*培養基 100mL 兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF圖片CL-0381MDA-MB-175VII(人導管癌細胞)5×106cells/瓶×2 LIPF Others Human 人 Gasic lipase / LIPF 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 人心肌細胞-心室總RNAHCF-av NA 大耳山羊腎細胞;LDG-2 皮下結締組織細胞,A9細胞 CT26.WT[CT26WT]細胞,小鼠結腸癌細胞 人胚肺二倍體細胞;KMB-17 HA Others H11N2 甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,兔角膜后基質層成纖維細胞;RCBBF圖片貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多其它源細胞。 |