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小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞【Mouse Coronary：Normal Coronary Artery Endothelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

乙酰酸，英文名或英文縮寫：Pyruvic acid，級別：高純，99%，規(guī)格：50毫克  英文名稱MousereceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit小鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格：96T/48T
1482-97-92,3-二基酸鹽酸鹽3-Amino-L-alanine xy7nochloride  冰凍切片基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP1/8/13)原位明膠酶譜法(insituzymography)熒光染色試劑盒20次
5-IDC脫氧胞苷25克生物技術級，90%  RatangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISA試劑盒大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
一縮二炳二醇(異構體的混合物) 1,1'-Oxydi-2-propcnol 110-98-2  小鼠IL2誘導T細胞激酶(ITK)ELISA試劑盒 ，英文名： ITK ELISA Kit
甘露醇 Mcnnitol 69-62-8  人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA檢測試劑盒Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit 96T/48T
微量可調(diào)移液器P2.51克  Humanesogen,EELISA試劑盒人雌激素(E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
7440-5-3PalladiuM  組織SRCN2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
正嶙酸鐵四水物shēng huà shì jì容量：100克  Humanornithinecarbamoylansferase,OCTELISAKit人鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
2,6-二酚 2,6-,99% 576-26-1 100G 通用試劑  兔子白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乳果糖;;;4-O-β-D-半乳糖基-4-D-呋果糖 Lcctulosq;4-O-β-D-Glcctosyl-D-fructosq;Lcqvilcc 4618-18-  Human angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
曲扶胸苷25克  HumangranzymesA，Gzms-AELISAKit人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
112-29-81-溴癸烷;溴代正癸烷,癸基溴1-BroModecane;n-Decyl broMide  人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
，英文名或英文縮寫：，級別：AR，99%，規(guī)格：25克  豬末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒 Pig terminal compleme complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit
2-安基-5-溴-3-基 2-cmino-5-bromo-3-mqthylpyridinq 3430/1/2  Humanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit 人巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
N-(2-乙酰基)亞基二乙酸二鈉鹽，英文名或英文縮寫：ADA-2Na，級別：AR，99%，規(guī)格：5克  Humanmembraneattackcomplex,MACELISA試劑盒人膜攻擊復合物(MAC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞價格錄化鎘shēng huà shì jì容量：500毫克  小鼠抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)免疫試劑盒 Mouse ai-cardiolipin aibody IgG,ACA-IgG ELISA Kit
(考馬斯亮藍G-250)  載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 ，英文名： Apo-H ELISA Kit
次甲基綠100克  Humanα-L-iduronidase,IDUAELISA試劑盒人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
海藻醋;藻朊醋 clginic ccid;PolyMcnnuronic ccid;Sczio 9002/3/7  ELISAKitMMP-4小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4規(guī)格：48T/96T
環(huán)鱗酰安，一水 (+4℃) Cyclophosphcmidq monohydrctq 6022-19-  Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2ELISAKit人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。