產品名稱 | 大鼠神經元細胞提取物培養 | 英文名稱 | Rat Brain : Normal Neuron CellsDerivatives | 貨號 | EYX99277 |
大鼠神經元細胞提取物【Rat Brain : Normal Neuron CellsDerivatives】 大鼠神經元細胞提取物是從大鼠原代神經元細胞提取的,大鼠原代神經元細胞從正常大鼠腦組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 ![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b308a4746a373f0adddc1d0f84d8b517907581032a6d36784940.png)
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b30890d5e434ca4166f0ee6a67be83e87fef79a8257d62f82f4f.png) 操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 大腸埃希氏菌O157:H7實時熒光PCR檢測試劑盒TTimosaponin AIII4599知母皂苷AIII 小腸結腸炎耶爾森氏菌實時熒光PCR檢測試劑盒TTigogenin77-劍麻皂素 空腸彎曲菌實時熒光PCR檢測試劑盒TTigecycline269 創傷弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TTiamulin552975泰妙菌素 溶藻弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TTiagabine hydrochloride1458219鹽酸噻加賓 Formestane 566-48-3 中文名:福美司坦 分子式:C19H26O3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠抗紅細胞抗體(RBC)ELISAKit Folic acid 59-30-3 中文名:葉酸 分子式:C19H19N7O6 度:98.0% 小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISAKit Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine 175291-56-2 中文名:Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯 分子式:C26H26NO8P 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠水通道蛋白elisa試劑盒 小鼠水通道蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠水通道蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠水通道蛋白試劑盒、小鼠水通道蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Fluoronaphthalene 321-38-0 中文名: 分子式:C10H7F 度:98.0% 小鼠抗胰蛋白酶elisa試劑盒 小鼠抗胰蛋白酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠抗胰蛋白酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠抗胰蛋白酶試劑盒、小鼠抗胰蛋白酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Fluorocytosine 2022-85-7 中文名: 分子式:C4H4FN3O 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠己糖激酶elisa試劑盒 小鼠己糖激酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠己糖激酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠己糖激酶試劑盒、小鼠己糖激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 順式-孟魯司特 cis-Montelukast 質量規格:美國進口 植物細胞染色體分離試劑盒20 21(R)-羥基孟魯司特 21(R)-Hydroxy Montelukast 質量規格:美國進口 植物細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10 21(S)-羥基孟魯司特 21(S)-Hydroxy Montelukast 質量規格:美國進口 植物細胞色素C氧化酶活性測定試劑盒20 孟魯司特二環己基胺鹽 Montelukast Dicyclohexylamine Salt 質量規格:美國進口 植物細胞周期G0期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10 孟魯司特1,2-二醇(非對映) Montelukast 1,2-Diol(Mixture of Diastereomers) 質量規格:美國進口 植物氧化應激活性氧(ROS)光澤精化學發光法定量檢測試劑盒50 ent-孟魯司特鈉鹽 ent-Montelukast Salt 質量規格:美國進口 植物葉綠體F型ATP酶(FtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 雙嘧達莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸 Dipyridamole Di-O-β-D-glucuronide 質量規格:美國進口 植物葉綠體外膜功能檢測試劑盒20 雙嘧達莫-D20 (主要的) Dipyridamole-D20 (Major) 質量規格:美國進口 植物葉綠體總蛋白定量檢測試劑盒20 雙嘧達莫單-O-β-D-葡萄糖苷酸 Dipyridamole Mono-O-β-D-glucuronide 質量規格:美國進口 植物葉片活性葉綠體分離試劑盒20 酮基他米巴羅汀 Keto Tamibarotene 質量規格:美國進口 植物乙醇酸氧化酶(glycolateoxidase)活性比色法定量檢測試劑盒20 大鼠神經元細胞提取物培養嗜酸粒細胞直接計數液 Product name said 3-tert-Butoxycarbony-2-(4-anisyl)-4-phenyl-5-oxazolidinecarboxylic acid 196404-55-4 中文名: 分子式:C22H25NO6 度:98.0% 關鍵詞: 嗜肺軍團桿菌(LP)核酸檢測試劑盒 48T 3-Quinuclidinone 3731-38-2 中文名:3-奎寧環酮 分子式:C7H11NO 度:98.0% 關鍵詞: 視網膜母細胞瘤蛋白1 英文名稱: Human Retinoblastoma Protein 1 規格: 48T/96T 英文縮寫: RBP1 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 2397-00-4 中文名:4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪 分子式:C30H22N2O2 食品DNA提取試劑盒 50T 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 103335-55-3 中文名: 分子式:C19H29NO3 度:98.0% 關鍵詞: 十六烷基基溴化胺 50g 3-O-Methyl-Estrone 1624-62-0 中文名:3-氧甲基基雌酮 分子式:C19H24O2 度:98.0% 關鍵詞: 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |