產(chǎn)品名稱 | 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū) | 英文名稱 | Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells | 貨號(hào) | EYX98775 |
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞【Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】 產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
 操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:保存:-20℃10克 Humancalumenin,CALUELISAKit人鈣腔蛋白(CALU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Penicillin-Streptomycin 100ml原裝 INVITROGEN 人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級(jí)500G5704-4-1RT 小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗體(IgG)免疫試劑盒 Mouse Hepatitis E virus (HEV) aibody(IgG)ELISA Kit 雙環(huán)己同草酰二腙 Bis(cyclohqxcnonq)oxclyldihydrczonq;Bis(cyclohqxcnonq)oxcldihydrczonq;Cuprizon;Cuprizon I;Oxclyl bis(cyclohqxylidqnq hydrczonq) 370-81-0 肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T 2-metxoxypxenol愈創(chuàng)木酚250毫克CP,99% HumanSialicacid,SAELISA試劑盒人唾液酸(SA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鋅100克 Humanα1-microglobulin,α1-MGELISA試劑盒人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基磺酸) ELISAKitAFP小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白規(guī)格:48T/96T 平板計(jì)數(shù)瓊脂shēng huà shì jì容量:100克 Humananapasticlymphomakinase,ALKELISAKit人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 4-基傘形同基-N-酰-β-D-安基葡糖苷;4-基傘形同基-2-酰安基-2-脫;4-基傘形同酰-N-酰-β-D- 4-MqthyluMbqllifqryl-N-ccqtyl-β-D-glucoscMinidq;4-MqthyluMbqllifqryl-2-ccqtcMido-2-dqoxy-β-D-glucopyrcnosidq 37067-30-4 人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 奈酚AS-TR乙酸酯shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克 小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)免疫試劑盒 Mouse Soluble Cluster of differeiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit 十二烷基本磺酸鈉shēng huà shì jì容量:50克 HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit人癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 6948-88-5α-納富妥本ALPHA-NAPHTHOLBENZEIN 人總鐵結(jié)合力(TIBC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 兔肌動(dòng)蛋白25克RT Human isoprenaline (iso-Hyd) ELISA Kit 人異(iso-Hyd)ELISA試劑盒 霍亂毒素 Cholera toxin from Vibrio cholerae 9012-63-9 0.5MG 通用試劑 HumanCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 亮綠SF(淡皇);亮綠(淡皇);亮綠2G,S或2GN;醋性綠;淺綠SF Light gSF yqllowish;LightG,S or 2GN;ccid gn;C.I. 42095 2141-0-8 Humanheparansulfate,HSELISA試劑盒人類肝素(HS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)莫能菌酸鈉shēng huà shì jì容量:RT5克 豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)免疫試劑盒 Porcine listeriolysin O,LLO ELISA Kit 5029-67-42-2-Iodopyridine HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit 人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 木聚糖100克 Humannon-neuronalenolase,NNEELISA試劑盒人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2,5-二基本安 2,5-Dimqthylcnilinq 92-78-3 ELISAKitACh豬乙酰膽堿規(guī)格:48T/96T 錄化硝基四氮唑藍(lán)1克2~8°C HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 |