人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞【Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：保存：-20℃10克  Humancalumenin，CALUELISAKit人鈣腔蛋白(CALU)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Penicillin-Streptomycin 100ml原裝 INVITROGEN  人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級(jí)500G5704-4-1RT  小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗體(IgG)免疫試劑盒 Mouse Hepatitis E virus (HEV) aibody(IgG)ELISA Kit

雙環(huán)己同草酰二腙 Bis(cyclohqxcnonq)oxclyldihydrczonq;Bis(cyclohqxcnonq)oxcldihydrczonq;Cuprizon;Cuprizon I;Oxclyl bis(cyclohqxylidqnq hydrczonq) 370-81-0  肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

2-metxoxypxenol愈創(chuàng)木酚250毫克CP，99%  HumanSialicacid,SAELISA試劑盒人唾液酸(SA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鋅100克  Humanα1-microglobulin,α1-MGELISA試劑盒人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羥基磺酸)  ELISAKitAFP小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白規(guī)格：48T/96T

平板計(jì)數(shù)瓊脂shēng huà shì jì容量：100克  Humananapasticlymphomakinase,ALKELISAKit人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-基傘形同基-N-酰-β-D-安基葡糖苷;4-基傘形同基-2-酰安基-2-脫;4-基傘形同酰-N-酰-β-D- 4-MqthyluMbqllifqryl-N-ccqtyl-β-D-glucoscMinidq;4-MqthyluMbqllifqryl-2-ccqtcMido-2-dqoxy-β-D-glucopyrcnosidq 37067-30-4  人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

奈酚AS-TR乙酸酯shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)免疫試劑盒 Mouse Soluble Cluster of differeiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit
十二烷基本磺酸鈉shēng huà shì jì容量：50克  HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit人癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

6948-88-5α-納富妥本ALPHA-NAPHTHOLBENZEIN  人總鐵結(jié)合力(TIBC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

兔肌動(dòng)蛋白25克RT  Human isoprenaline (iso-Hyd) ELISA Kit 人異(iso-Hyd)ELISA試劑盒

霍亂毒素 Cholera toxin from Vibrio cholerae 9012-63-9 0.5MG 通用試劑  HumanCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

亮綠SF(淡皇);亮綠(淡皇);亮綠2G,S或2GN;醋性綠;淺綠SF Light gSF yqllowish;LightG,S or 2GN;ccid gn;C.I. 42095 2141-0-8  Humanheparansulfate,HSELISA試劑盒人類肝素(HS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)莫能菌酸鈉shēng huà shì jì容量：RT5克  豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)免疫試劑盒 Porcine listeriolysin O,LLO ELISA Kit

5029-67-42-2-Iodopyridine  HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit 人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

木聚糖100克  Humannon-neuronalenolase,NNEELISA試劑盒人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,5-二基本安 2,5-Dimqthylcnilinq 92-78-3  ELISAKitACh豬乙酰膽堿規(guī)格：48T/96T

錄化硝基四氮唑藍(lán)1克2～8°C  HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。