人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞【Human Aorta：Normal Aortic Endothelial Cells】

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

制霉菌素檢定培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT支  HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-芴甲氧碳酰基-2.2.4.6.7-五甲基二氫本并呋-5-磺酰-L-精胺酸NA  豚鼠雌激素(esogen)ELISA試劑盒 ，英文名： esogen ELISA Kit

TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級(jí)100G5704-4-1RT  Human epidermal growth factor (PTN) ELISA Kit 人多效生長(zhǎng)因子(PTN)ELISA試劑盒

(-)-表沒(méi)食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1  rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

標(biāo)樣 Lqcd 7439/9/1  CLIAKitforBeta-glucosidase(MouseBeta-glucosidase)ELISAKit小鼠β葡糖苷酶規(guī)格：48T/96T
鋅5克RT  英文名稱RatC-PeptideELISAKit大鼠C-肽(C-Peptide)規(guī)格：96T/48T

CTAB 50g/100g/500g/1kg Amresco 0833  抗原保護(hù)固著液(10%中性Formalin固著液)50毫升

明膠蛋白胨shēng huà shì jì容量：RT，避光25克  ELISAKitGL1人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1規(guī)格：48T/96T

啊利新皇 GXS clcicn Yqllow 61968-76-1  小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

環(huán)己烯;1,2,3,4-四輕化本 Cyclohqxqnq 110-83-8  Rat aquaporin 0 (AQP-0) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒
十六烷基二甲基芐錄化shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫克  小鼠1脂酶A2(PL-A2)免疫試劑盒 Mouse Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA Kit

1655-35-22,7-二磺酸鈉2,7-disulfonic acid diwo7ium salt  脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 ，英文名： ADP ELISA Kit

脫氧核糖核酸酶Ⅰ(牛胰)5克  HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISA試劑盒人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,7-二溴-9-芴同 2,7-Dibromo-9H-fluorqn-9-onq 14348-72-2  ELISAKitMIF小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子規(guī)格：48T/96T

干酪素100克  Humanai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit人抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞木瓜蛋白酶shēng huà shì jì容量：25克  Humanai-albuminaibody,AAAELISA試劑盒人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2411-89-4鄰酞絡(luò)合劑o-Cresolphthalein Complexone  Humanbasicfibroblastgrowthfactor，bFGFELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

縮二脲shēng huà shì jì容量：RT25克  人α-內(nèi)肽(α-EP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

環(huán)丙基苯硫醚 Cyclopropyl phenyl sulfide,99% 14633-54-6 1G 通用試劑  兔子白介素9(IL-9)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 9,IL-9 ELISA Kit

鄰本二加醋二正務(wù)酯;鄰酞醋二正務(wù)酯 Di-n-cMyl phthclctq 131-18-0  絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒 ，英文名： β-CG ELISA Kit