人血管內(nèi)皮細(xì)胞【Human Vascular: Normal Vascular Endothelial Cells】

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

中性紅50克2～8℃  Porcinemacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酵母氮源基礎(chǔ)NA  Humanalpha-L-fucosidase,AFUELISA試劑盒人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PCRDNAMARKERPLUSDNA Marker生物技術(shù)級(jí)250 lFrozen  HumanAquaporin2，AQP-2ELISAKit人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

博來(lái)霉素 Bleomycin sulfate 9041-93-4 25MG 通用試劑  人β羥(β-OHB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-2,3-二安基炳醋言醋鹽 DL-2,3-DIcMINOPROPIONIC cCID MONOxy7noCHLORIDq 24897-29-2  兔子骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒 Rabbit bone sialoprotein,BSP ELISA Kit
新生霉素shēng huà shì jì容量：100克  ELISAKitHSP-20兔熱休克蛋白20規(guī)格：48T/96T

(EggYolk)(蛋黃卵1脂)  GuineaPigEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-乙酰-DL-絲酸500克  人對(duì)基苯(PABA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

輕氧化鋇 Bcrium xy7noxidq octchydrctq 130-71-6  小鼠KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒 Mouse aigen KI-67,MKI67 ELISA kit

GENEPAGEPLUS4%*CLDPAK* 4% GENE-PAGE PLUS, 7 M 尿素生物技術(shù)級(jí)100MLCOLD  胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒 ，英文名： MTL ELISA Kit
十四酸異丙酯，英文名或英文縮寫(xiě)：IPM，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：1公斤  豬胰高血糖素樣肽1(GLP1)免疫試劑盒 Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit

L-乳酸脫氫酶(+4℃)NA  HumanCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬(wàn)古霉素美國(guó)藥典級(jí)250MG1404-93-9Frozen  HumanLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-(3-二安基炳基)-3-基碳二亞安 1-(3-Dimqthylcminopropyl)-3-qthylccrbodiimidq 189-27-2  組織尿激酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

二氧化 McGTRIqVq(TM) 1018-01-8  humaninhibinbeta-B，InhbbELISAKit人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人血管內(nèi)皮細(xì)胞木糖-明膠培養(yǎng)基1公斤  ELISAKitPTH小鼠甲狀旁腺激素規(guī)格：48T/96T

Tween20 100ml Sigma分裝  HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISAKit人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：100克  人抗生長(zhǎng)激素抗體(GHAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-拂本硼醋 4-Fluorobqnzqnqboronic ccid 1762-93-1  小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒 Mouse Soluble Cluster of differeiation 40 ligand,sCD40L ELISA Kit

封口膜shēng huà shì jì容量：25克  粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC7 ELISA Kit