產(chǎn)品名稱 | 小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物說明書 | 英文名稱 | Mouse Aorta:Normal Aortic Endothelial Cell Derivatives | 貨號(hào) | EYX99146 |
小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Mouse Aorta:Normal Aortic Endothelial Cell Derivatives】 小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的,小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常小鼠主動(dòng)脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
 操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 腦炎病毒檢測(cè)試劑盒(基因芯片法)盒Salvisyrianone26917 常見分枝桿菌檢測(cè)試劑盒(基因芯片法)盒S-Benzothiazolyl2-amino-alpha-(methoxyimino)-thiazolethiolacetate7565AE活性酯 立克次體甄別檢測(cè)試劑盒(基因芯片法)盒Rubioncolin C1322422 碳青霉烯類耐藥檢測(cè)試劑盒(基因芯片法)盒Rubianthraquinone6449674 超級(jí)耐藥檢測(cè)試劑盒(基因芯片法)盒Rubiadin1172甲基異茜草素 Lincomycin 中文名:林可霉素 分子式:C18H34N2O6S 豬催乳素(PRL)ELISA試劑盒 Linagliptin 中文名:利拉利汀 分子式:C25H28N8O2 豬促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒 hydrochloride 中文名:鹽酸利多卡因 分子式:C14H23ClN2O 豬促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒 中文名:利多卡因 分子式:C14H22N2O 豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 Levodopa 中文名:左旋多巴 分子式:C9H11NO4 豬低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒 亞太因 HPLC≥95% 20mg RatLeptospiraIgG,LepIgGELISA試劑盒大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 反式橙花叔醇 HPLC≥95% 20mg Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異嗪皮啶ObetaD葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISA試劑盒大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 香柑醇; 羥基,并香豆素 HPLC≥95% 20mg Ratleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 洋槐黃素 HPLC≥95% 20mg Ratleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA試劑盒大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 梓醇咖啡酸酯 HPLC≥95% 20mg RatLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氧代表千金藤默星堿 HPLC≥95% 20mg RatLeukoieneB4,LT-B4ELISA試劑盒大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 長春尼定 HPLC≥95% 20mg RatLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 松柏苷; 松苷 HPLC≥95% 20mg RatLeukoieneC4,LT-C4ELISA試劑盒大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 馬兜鈴內(nèi)酰胺BIII HPLC≥95% 20mg RatleukoieneE4,LT-E4ELISAKit大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物說明書高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Stigmasta-4,25-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O 高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T Stigmasta-4,25-dien-3-one 848669-08-9 中文名: 分子式:C29H46O 度:% 關(guān)鍵詞: 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 高遷移率族蛋白 (HMGB1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Norfloxacin 70458-96-7 中文名:諾氟沙星 分子式:C16H18FN3O3 高度質(zhì)粒中量提取試劑盒 High purity plasmid exact Kit Torososide A 165689-32-7 中文名: 分子式:C38H32O15 高度質(zhì)粒小量提取試劑盒 High purity Plasmid Exaction Kit Torososide A 中文名: 分子式:C38H32O15 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 |