大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物【Rat Eye: Normal Lens Epithelial Cells Derivatives】 大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代晶狀體上皮細(xì)胞提取的,大鼠原代晶狀體上皮細(xì)胞從正常大鼠眼組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) | 大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物 | Rat Eye: Normal Lens Epithelial Cells Derivatives | EYX99267 |
![](https://img78.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b308db903aa4e91d31bf2fb5f79b175fe4a42affd390a9073fed.jpg)
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。 細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
![](https://img77.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b30889f30d7195507b9828ca3dda0239c2604d184abac584cfd4.jpg) 實(shí)驗(yàn)事項(xiàng): 1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。 6. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。 7. 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。 注意事項(xiàng): 1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。 3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。 4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 蛋白酶抑制劑Cocktail(片劑)5×1ml2-Carbamoyl-hydroxy,4-naphthoquinone364 蛋白酶抑制劑混合物(0×,哺乳動(dòng)物樣品提取用)1ml/5×1ml 2-Benzylsuccinic acid39726 蛋白酶抑制劑混合物(0×,通用型)1ml/5×1ml 2-Benzylaminopyridine693572-苯甲基氨基吡啶 蛋白酶抑制劑混合物(0×,細(xì)菌抽提用)1ml/5×1ml 2-Benzylacrylic acid56699 蛋白酶抑制劑混合物(0×,真菌或酵母抽提用)1ml/5×1ml 2-Benzyl-(dimethylamino)'-morpholinobutyrophenone11931322-芐基-(二甲基氨基)'-嗎啉基苯基丁酮 Gimeracil 103766-25-2 中文名:吉莫斯特 分子式:C5H4ClNO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠酸性成纖維生長(zhǎng)因子(mouse a-FGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Gemcitabine 95058-81-4 中文名:吉西他濱 分子式:C9H11F2N3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(mouse b-FGF/FGF-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Gefitinib 184475-35-2 中文名:吉非替尼 分子式:C22H24ClFN4O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠Fibronectin(mouse Fibronectin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Gatifloxacin Mesylate 316819-28-0 中文名:甲磺酸加替沙星 分子式:C20H26FN3O7S 度:98.0% 小鼠Flt3(mouse Flt3) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ganciclovir 82410-32-0 中文名:更昔洛韋 分子式:C9H13N5O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠廋素 英文名稱: Leptin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Leptin 四氫鴨腳木堿 HPLC≥98% 5mg RabbitCystatinC,Cys-CELISA試劑盒兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 四乙酸堪非醇酯 HPLC≥98% 5mg RabbitD-Dimer,D2DELISA試劑盒兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 松柏酸 HPLC≥98% 5mg rabbitDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒兔子脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蘇木查耳酮 HPLC≥98% 5mg RabbitDihydrotestosterone,DHTELISA試劑盒雙氫睪同(DHT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蘇式C丁香酚基丙三醇 HPLC≥98% 5mg rabbitEndostatin,ESELISA試劑盒兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 酸橙素烯醇 HPLC≥98% 5mg RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蒜糖醇 HPLC≥98% 5mg RabbitEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISA試劑盒兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 算盤子二醇 HPLC≥98% 5mg rabbitEndothelin1,ET-1ELISA試劑盒兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 算盤子酮醇 HPLC≥98% 5mg RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 中國(guó)臺(tái)灣三尖杉?jí)A HPLC≥98% 5mg rabbitEsadiol,E2ELISA試劑盒兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽elisa試劑盒 山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒、山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 99469-99-5 中文名: 分子式:C13H16O5 山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 中文名: 分子式:C13H9ClFNO3 山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 4568-71-2 中文名:3-芐基-5-(2-羥乙基)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS 山羊皮質(zhì)醇 英文名稱: Coisol 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CO 3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 26614-48-2 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2 山羊內(nèi)啡肽(EP)ELISA試劑盒 3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide 66304-01-6 中文名:3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物 分子式:C7H4O3S2 |