大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞提取物【Rat Eye: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells Derivatives】

大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞提取的，大鼠原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞從正常大鼠眼組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

登革熱病毒通用單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Tolvaptan168托伐普坦

登革熱病毒Ⅰ型單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Abiraterone acetate1542298乙酸阿比特龍酯

登革熱病毒Ⅱ型單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Esomeprazole 1617968埃索美拉唑鈉

登革熱病毒Ⅲ型單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Clevidipine butyrate1672211丁酸氯維地平

登革熱病毒Ⅳ型單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Azilsartan14733阿齊沙坦
Glaraldehydesolion   500ml  Anthraquinone  84-65-1  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2 

Glaraldehydesolion   500ml                 Anthraglycoside B  中文名：大黃素-8-O-葡萄糖苷  分子式：C21H20O10 

G-418抗菌素   1g  4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone  中文名：四乙基米氏酮  分子式：C21H28N2O  度：98.0%

G-418Sulfate   5g                 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone  中文名：四乙基米氏酮  分子式：C21H28N2O 

FuchsinAcid   25g  4,4'-Cyclohexylidenebisphenol  843-55-0  中文名：4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚  分子式：C18H20O2
松柏醇  Coniferyl alcohol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma223735 人游離蛋白S(FP-S)ELISA檢測試劑盒HumanFreeProteinS,FP-SELISAKit 96T/48T

乙酰輔酶A鈉鹽  Acetyl coenzyme A  salt    質(zhì)量規(guī)格：≥93%,美國進口 人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA檢測試劑盒Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit 96T/48T

肌苷酸二鈉  Di 5'-Inosinate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人游離原卟啉(FEP)ELISA檢測試劑盒HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISAKit 96T/48T

環(huán)索奈德  Ciclesonide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA檢測試劑盒Humaninducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT 96T/48T

環(huán)索奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ciclesonide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 人魚精蛋白(Protamine)ELISA檢測試劑盒HumanProtamineELISAKit 96T/48T

酪氨酰氨  L-Tyrosine amide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma進分 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA檢測試劑盒HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 96T/48T

皂素；茶皂素  saponin  質(zhì)量規(guī)格：BR,皂素>80% 人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA檢測試劑盒HumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit 96T/48T

炔諾酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Norethindrone  質(zhì)量規(guī)格：>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 人脂0壁酸(LTA)ELISA檢測試劑盒Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit 96T/48T

炔諾酮  Norethindrone  質(zhì)量規(guī)格：>97% 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA檢測試劑盒HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 96T/48T

可的松(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cortisone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品 人脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA檢測試劑盒HumanLipopolysaccharides,LPSELISAKit 96T/48T
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)山羊壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒     3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid  162401-62-9  中文名：  分子式：C12H12F2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

山羊骨形成蛋白2（BMP-2）ELISA試劑盒         組裝/原裝  3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  中文名：  分子式：C7H11NO  度：98.0%

山羊孤啡肽（OFQ/N）ELISA試劑盒              3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  中文名：  分子式：C7H11NO 

山羊促生長激素釋放激素elisa試劑盒   山羊促生長激素釋放激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   山羊促生長激素釋放激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：山羊促生長激素釋放激素試劑盒、山羊促生長激素釋放激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene  443882-99-3  中文名：  分子式：C13H9ClFNO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

山羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒     3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone  928165-59-7  中文名：  分子式：C17H25ClO  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。