人體膠質(zhì)瘤組織提取物【Cancer: Human Glioma Derivatives】

膠質(zhì)瘤是發(fā)生于神經(jīng)外胚層的腫瘤，故亦稱神經(jīng)外胚層腫瘤或神經(jīng)上皮腫瘤。腫瘤起源于神經(jīng)間質(zhì)細胞，即神經(jīng)膠質(zhì)、室管膜、脈絡叢上皮和神經(jīng)實質(zhì)細胞，即神經(jīng)元。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體膠質(zhì)瘤組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

Neutral Red 中性紅   5g(1R,2R)-Amino-inda6613(1R,2R)-氨基-茚醇

Nicotinamide(煙酰胺)   25g(+)-Taddol933799(+),5-雙[羥基(二苯基)甲基],2-二甲基,3-二氧戊環(huán)

Nicotinic acid(煙酸)   25g(+)-Noe's reagent8724(+)-核歐沃豪斯效應試劑

Ninhydrin 茚三酮   5g (-)-Phaselic acid42319

NP   0ml (-)-Noe's Reagent319(-)-核歐沃豪斯效應試劑
Dioxopromethazine hydrochloride  15374-15-9  中文名：鹽酸二氧丙嗪  分子式：C17H21ClN2O2S                  

Aspirin  50-78-2  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4    兔S100A6蛋白   英文名稱：   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   S100A6

Oxytetracycline hydrochloride  2058-46-0  中文名：鹽酸土霉素  分子式：C22H25ClN2O9    兔可溶性細胞間黏附分子1   英文名稱：   Rabbit soluble Iercellular Adhesion Molecular 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   sICAM-1

Flumequine  42835-25-6  中文名：氟甲喹  分子式：C14H12FNO3    兔基質(zhì)細胞衍化生長因子1a   英文名稱：   Rabbit Somal cell Derived Factor 1a   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SDF1a

Valnemulin hydrochloride  133868-46-9  中文名：鹽酸沃尼妙林  分子式：C31H53ClN2O5S    兔超氧化物歧化酶   英文名稱：   Rabbit Superoxide Dismase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SOD
（標準品）  Hydrocortisone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T

富馬酸伊布利特  Ibutilide fumarate   質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠低密度脂蛋白復合物(LDL-IC)ELISA檢測試劑盒RatLDL-ICELISAKit 96T/48T

富馬酸伊布利特(標準品)  Ibutilide fumarate   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA檢測試劑盒Rathypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 96T/48T

硫酸異帕米星  Isepamicine Sulphate  質(zhì)量規(guī)格：含量≥670µg/mg 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA檢測試劑盒raesistinELISAKit 96T/48T

蓓薩羅丁;貝沙羅汀  Bexarotene  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA檢測試劑盒RatAzidothymidine,AZTELISAKit 96T/48T

蓓薩羅丁(標準品)  Bexarotene  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA檢測試劑盒Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit 96T/48T

酮洛芬  Ketoprofen  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR 大鼠多巴胺(DA)ELISA檢測試劑盒Ratdopamine,DAELISAKit 96T/48T

酮洛芬(標準品)  Ketoprofen  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit 96T/48T

富馬酸酮替芬  Ketotifen fumarate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白(DAT)ELISA檢測試劑盒Ratdopamineanspoer,DATELISAKit 96T/48T

富馬酸酮替芬(標準品)  Ketotifen fumarate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品 大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA檢測試劑盒Ratcatecholamine,CAELISAKit 96T/48T
人體膠質(zhì)瘤組織提取物說明書兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISAKIT     6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  36450-01-8  中文名：  分子式：C29H46O2  度：%  關鍵詞：  豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒     6-Hydroxyrubiadin  87686-86-0  中文名：6-羥基甲基異茜草素  分子式：C15H10O5  度：97.5%  關鍵詞：  抗氧化; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒     6-Hydroxyrubiadin  87686-86-0  中文名：6-羥基甲基異茜草素  分子式：C15H10O5 

兔子補體蛋白4(C4)ELISAKit     Adefovir  106941-25-7  中文名：阿德福韋  分子式：C8H12N5O4P 

兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒     6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole hydrochloride  中文名：  分子式：C12H14ClFN2O  度：98.0%

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。