大鼠腎足突細(xì)胞提取物【Rat Kidney: Normal Kidney Derivatives】

大鼠腎足突細(xì)胞提取物是從大鼠原代腎足突細(xì)胞提取的，大鼠原代腎足突細(xì)胞從正常大鼠腎組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

動(dòng)物組織基因提取試劑盒（磁珠法）96 2'-Methylacetanilide16乙酰

病毒RNA提取試劑盒（普通法）2-Acetonaphthone1993/8/32'-萘乙酮

病毒RNA提取試劑盒（過(guò)柱法）1'-Acetonaphthone94181'-萘乙酮

RNA裂解液0mlN-Acetoacetylmorpholine166954N-乙酰嗎啉

病毒DNA/RNA提取試劑盒（磁珠法）964'-Methoxyacetoacetanilide54378對(duì)乙酰乙酰
Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  177602-14-1  中文名：  分子式：C29H58O5    HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit 人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

2-C-Methyl-D-erythritol  58698-37-6  中文名：2-C-甲基-D-赤蘚糖醇  分子式：C5H12O4    HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名：  分子式：C8H16O4    組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次(10樣本)

Linderaspirone A  1235126-46-1  中文名：  分子式：C34H32O10    HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester  124111-47-3  中文名：  分子式：C26H52O3    兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
酸性紅88   Acid Red 88  質(zhì)量規(guī)格：AR,進(jìn)分 人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmacrophagestimulatingprotein,MSPELISAKit 96T/48T

酸性紅183  Acid Red 183  質(zhì)量規(guī)格：AR,* 人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)試劑盒 Human MSP ELISA Kit

酸性紅9  Acid Red 9  質(zhì)量規(guī)格：AR,進(jìn)分 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒 Human M-CSF ELISA kit

孔雀石綠  Malachite green  質(zhì)量規(guī)格：BS 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體(M-CSFR)試劑盒 Human M-CSFR ELISA Kit

燦爛綠,亮綠  Brilliant green  質(zhì)量規(guī)格：BS 人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 Human MDC ELISA kit

甲基綠  Methyl Green  質(zhì)量規(guī)格：BS 人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmacrophagechemotaticfactor,MCFELISAKit 96T/48T

茜素綠;酸性綠25  Alizarin green  質(zhì)量規(guī)格：BS 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 Human MIP-1α ELISA kit

萘酚綠B  Naphthol Green B  質(zhì)量規(guī)格：BS 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒 Human MIP-1β ELISA kit

固綠FCF  Fast Green FCF  質(zhì)量規(guī)格：BS 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)試劑盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit

子種綠A；藍(lán)A  Alphazurine A  質(zhì)量規(guī)格：BS 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒 Human MIP-3α ELISA kit
大鼠腎足突細(xì)胞提取物價(jià)格三0酸腺苷酶   英文名稱：   Adenosine iphosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ATP  3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  16691-43-3  中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式：C2H4N4S  度：98.0%   

三0酸脫氧核苷酸混合溶液   10x0.5ml  Amoxapine  中文名：阿莫沙平  分子式：C17H16ClN3O  度：98.0%

三(羥甲基)基鹽酸鹽   100g  3-Amino-4-methylbenzamide  19406-86-1  中文名：3-氨基-4-甲基苯甲酰胺  分子式：C8H10N2O  度：98.0%   

腮腺炎病毒(MuV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T  3-Amino-4-hydroxybenzoic acid  1571-72-8  中文名：3-氨基-4-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%   

瑞氏－姬姆薩復(fù)合染液   Vascular permeability test solion  3-Amino-3-phenylpropionic acid  614-19-7  中文名：C9H11NO2  分子式：C9H11NO2  度：98.0%