產品名稱 | 小鼠膀胱上皮細胞提取物說明書 | 英文名稱 | Mouse Bladder: Normal Bladder Derivatives | 貨號 | EYX99142 |
小鼠膀胱上皮細胞提取物【Mouse Bladder: Normal Bladder Derivatives】 小鼠膀胱上皮細胞提取物是從小鼠原代膀胱上皮細胞提取的,小鼠原代膀胱上皮細胞從正常小鼠膀胱組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 ![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b308a4746a373f0adddc1d0f84d8b517907581032a6d36784940.png)
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
![](https://img79.afzhan.com/gxhpic_5b51112aee/376c8934ea4c5023c880e8e71f70b30890d5e434ca4166f0ee6a67be83e87fef79a8257d62f82f4f.png) 操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 牛布氏桿菌病ELISA檢測試劑盒(間接法)19211α-Hydroxycanrenone1925697 牛布氏桿菌病cELISA檢測試劑盒(競爭法)192Eplerenone772依普利酮 (注:競爭法確證區分野毒和疫苗抗體)Flumethasone21357氟米松 牛結核桿菌病γ干擾素ELISA檢測試劑盒(確證)1923-Oxo-aza-alpha-androstane7β-carboxylic acid33355 牛結核桿菌抗體ELISA檢測試劑盒(篩選)1923-(4-Chlorobutyl)indole-carbonitrile1436129 Lomefloxacin hydrochloride 中文名:鹽酸洛美沙星 分子式:C17H20ClF2N3O3 度:98.0% 小鼠多巴胺D1受體elisa試劑盒 小鼠多巴胺D1受體試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠多巴胺D1受體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠多巴胺D1受體試劑盒、小鼠多巴胺D1受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Tetracycline 中文名:四環素 分子式:C22H24N2O8 度:97.0% 小鼠受體亞型elisa試劑盒 小鼠受體亞型試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠受體亞型試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠受體亞型試劑盒、小鼠受體亞型eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Sulfaguanidine 中文名:磺胺脒 分子式:C7H10N4O2S 度:99.0% 小鼠毒性休克綜合征elisa試劑盒 小鼠毒性休克綜合征試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠毒性休克綜合征試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠毒性休克綜合征試劑盒、小鼠毒性休克綜合征eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Gatifloxacin Mesylate 中文名:甲磺酸加替沙星 分子式:C20H26FN3O7S 度:98.0% 小鼠泛素蛋白elisa試劑盒 小鼠泛素蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠泛素蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠泛素蛋白試劑盒、小鼠泛素蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Flumequine 中文名:氟甲喹鈉 分子式:C14H11FNNaO3 度:98.0% 小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒 鹽霉素,沙利霉素 Salinomycin 質量規格:assay 12%~24% 小鼠層粘連蛋白(LN)ELISA試劑盒 ,英文名: LN ELISA Kit 仙茅苷 Curculigoside 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠層粘連蛋白α1(LAMα1)ELISA試劑盒 ,英文名: LAMα1 ELISA Kit 丹皮酚原苷;牡丹酚原甙 Paeonolide 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠層粘連蛋白β1(LAMβ1)ELISA試劑盒 ,英文名: LAMβ1 ELISA Kit 氧化槐定堿(標準品) oxysophoridine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠叉頭框蛋白03(FoxP3)ELISA試劑盒 ,英文名: FoxP3 ELISA Kit 一葉秋堿 ,一葉萩堿 Securinine 質量規格:HPLC≥98%,對照品 小鼠叉頭框蛋白A2(FOXA2)ELISA試劑盒 ,英文名: FOXA2 ELISA Kit 遠志口山酮;遠志山酮III Polygalaxanthone III 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠叉頭框蛋白M1(FOXM1)ELISA試劑盒 ,英文名: FOXM1 ELISA Kit 雷公藤定堿 Wtlfordine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠叉頭框蛋白O3(FOXO3)ELISA試劑盒 ,英文名: FOXO3 ELISA Kit 三基十四烷基氯化膦 Tributyltetradecylphosphonium chloride 質量規格:50%grade 小鼠叉頭框蛋白P3(FOXP3)ELISA試劑盒 ,英文名: FOXP3 ELISA Kit 羅漢果皂苷ⅢA1 mogroside ⅢA1 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠腸型脂肪酸結合蛋白(FABP2)ELISA試劑盒 ,英文名: FABP2 ELISA Kit 羅漢果皂苷ⅡA2 mogroside II A2 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA檢測試劑盒Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 96T/48T 小鼠膀胱上皮細胞提取物說明書甘油三酯(TG)含量測定試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 Atractylodin 中文名:蒼術素 分子式:C13H10O 甘油0酸 10g Androstenediol-3-acetate 中文名:雄甾烯二醇-3-乙酸酯 分子式:C21H32O3 度:98.0% 甘露聚糖結合凝集素絲酸肽酶-2 英文名稱: mannan-binding lectin associated serine proteases 規格: 48T/96T 英文縮寫: MASP-2 3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan 中文名: 分子式:C17H16ClIO2 富組酸糖蛋白 英文名稱: rich in histidine glycoprotein 規格: 48T/96T 英文縮寫: HPRG Norethindrone 68-22-4 中文名:炔諾酮 分子式:C20H26O2 度:98.0% 關鍵詞: 輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Pregn-5-ene-3β,17α,20S-triol 中文名: 分子式:C21H34O3 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |